《流式細胞術――原理、操作及套用（第二版）》是2014年科學出版社出版的圖書，作者是陳朱波、曹雪濤。
基本介紹
- 中文名：流式細胞術――原理、操作及套用（第二版）
- 作者：陳朱波, 曹雪濤
- ISBN：9787030390974
- 類別：圖書>自然科學>生物科學>細胞學
- 定價：¥68.00
- 出版社：科學出版社
- 出版時間：2014年01月
- 裝幀：平裝
- 開本：16開
內容簡介,作者簡介,目錄,
內容簡介
流式細胞術——原理、操作及套用(第二版)主要介紹流式細胞術的原理、操作及套用，分為概述、流式細胞儀的原理、流式圖、流式細胞術的基本操作與技巧、流式分析術的套用和流式分選術的套用6個部分。概述部分介紹基本概念和幾款常見的流式細胞儀；原理部分具體介紹流式細胞儀的液流系統、光路系統、檢測分析系統和分選系統；流式圖部分主要介紹了流式通道、流式直方圖、流式散點圖和流式等高線圖；操作部分介紹了樣品製備、螢光素偶聯抗體及標記、光電倍增管電壓設定、對照設定、補償調節、閾值設定、死細胞問題處理、分選模式選擇、上樣速度控制、分選設門原則、分選基本步驟等內容；流式分析術的套用部分具體介紹了流式細胞術在免疫學方面的套用，並且擴展到基礎醫學和生物學方面的套用；流式分選術的套用部分闡述了不同條件下流式分選的策略選擇和注意事項，同時還介紹了各種幹細胞包括腫瘤幹細胞等的流式分選方法。
作者簡介
曹雪濤，中國工程院院士，現任中國醫學科學院院長、北京協和醫學院校長。中國免疫學會理事長，醫學免疫學國家重點實驗室主任，全軍免疫與基因治療重點實驗室主任，“長江計畫”特聘教授，國家免疫學重點學科帶頭人，國家傑出青年科學基金獲得者，國家973免疫學項目首席科學家，863計畫醫藥生物技術領域專家，國家自然科學基金免疫學重大項目和創新團隊項目負責人，國務院學位評議委員會學科評議組委員。
目錄
序
第二版前言
第一版前言
1概述 1
1.1流式細胞術基本概念 2
1.2分析型流式細胞儀介紹 5
1.3分選型流式細胞儀介紹 9
參考文獻 13
2流式細胞儀的原理 14
2.1液流系統 15
2.2光路系統 18
2.3檢測分析系統 28
2.4分選系統 32
參考文獻 37
3流式圖 39
3.1流式通道 40
3.2流式直方圖 41
3.3流式散點圖 45
3.4流式等高線圖 48
參考文獻 50
4流式細胞術的基本操作與技巧 51
4.1樣品製備 52
4.1.1獨立細胞樣品製備 52
4.1.2免疫器官樣品製備 54
4.1.3實體臟器樣品製備 55
4.2螢光素偶聯抗體及其標記方法 56
4.2.1螢光素 57
4.2.2螢光素偶聯抗體 61
4.2.3樣品封閉 62
4.2.4螢光素偶聯抗體標記 64
4.3光電倍增管電壓設定 66
4.4對照的設定 71
4.4.1陰性對照的設定 71
4.4.2FMO對照 73
4.4.3陽性對照的設定 74
4.5補償調節 75
4.5.1補償調節的原理 75
4.5.2調節補償的具體方法 76
4.5.3三色和四色分析補償調節方法 79
4.5.4影響補償大小的因素 82
4.6閾值設定 84
4.7流式分析中的死細胞問題 85
4.7.1減少樣品中死細胞比例的方法 86
4.7.2流式分析時區分死細胞和活細胞的方法 86
4.8流式分選模式選擇 91
4.8.1純化模式 92
4.8.2富集模式 93
4.8.3單細胞模式 93
4.9上樣速度控制 94
4.9.1流式分析速度控制 95
4.9.2流式分選速度控制 95
4.10分選設門基本原則 97
4.11流式分選基本步驟 99
參考文獻 100
5流式分析術的套用 102
5.1細胞群比例測定 103
5.2表型測定 109
5.3檢測細胞因子 115
5.3.1胞內染色法檢測細胞因子 116
5.3.2胞內染色法與ELISA法比較 123
5.3.3CBA法測定細胞因子 125
5.3.4CBA法與ELISA法比較 127
5.4檢測細胞增殖 128
5.4.1相對計數法 129
5.4.2示蹤染料標記法 133
5.4.3BrdU和EdU摻入法 138
5.4.4其他方法 141
5.5檢測細胞凋亡 142
5.5.1annexin V/PI雙染色法 142
5.5.2SYTO/PI雙染色法 145
5.5.3細胞DNA含量分析法檢測細胞凋亡 146
5.5.4線粒體損傷檢測法 147
5.5.5活化的caspase-3檢測法 151
5.5.6螢光素偶聯的caspase抑制劑(FLICA)標記法 151
5.5.7甲醯胺誘導ssDNA單抗檢測法 152
5.5.8TUNEL法 153
5.6檢測細胞周期 154
5.6.1非特異性核酸螢光染料標記法 154
5.6.2特異性細胞周期調節蛋白檢測法 159
5.7檢測細胞殺傷能力 160
5.8檢測細胞吞噬功能 166
5.9檢測胞內活化的激酶 168
5.10檢測細胞自噬 169
5.11檢測基因表達 171
5.11.1GFP報告基因系統 171
5.11.2lacZ報告基因系統 172
5.11.3β-內醯胺酶報告基因系統 173
5.11.4新型膜結合型報告分子系統 174
5.12檢測細胞內兩種蛋白質的直接結合 174
5.12.1螢光共振能量轉移結合流式細胞術檢測兩種蛋白質的直接結合 174
5.12.2雙分子螢光互補結合流式細胞術檢測兩種蛋白質的直接結合 176
5.13微生物學中的套用 177
5.13.1螢光素偶聯抗體直接檢測法 178
5.13.2抗體結合人工螢光微球直接檢測法 179
5.13.3微生物活性流式檢測 179
5.13.4人工微球螢光免疫試驗檢測抗體 180
5.13.5螢光原位雜交流式檢測法 181
5.13.6PCR免疫微珠法 182
5.13.7原位PCR雜交流式檢測法 182
5.14檢測鈣相關分子 183
5.14.1檢測細胞內游離的鈣離子水平 183
5.14.2檢測鈣蛋白酶活性 184
5.14.3檢測細胞膜鈣泵活性 186
5.15表觀遺傳學中的套用 188
5.15.1ChIP-on-beads法 189
5.15.2檢測細胞水平組蛋白修飾情況 191
5.16檢測縫隙連線介導的細胞通訊 191
5.17檢測細胞內pH值和鈉氫轉運體活性 194
5.17.1檢測細胞內pH值 194
5.15.2檢測鈉氫轉運體活性 196
5.18其他套用 197
5.18.1檢測活性氧簇 197
5.18.2檢測細胞內游離的鋅離子水平 198
5.18.3檢測端粒長度 199
5.18.4檢測脂筏結合蛋白 201
引文目錄 203
參考文獻 207
6流式分選術的套用 211
6.1流式分選與磁性分選 212
6.2流式分選獨立群體細胞 214
6.3流式分選非獨立細胞群體 216
6.4流式分選低比例細胞群體 220
6.4.1強勢細胞群的輻射影響 220
6.4.2流式分選結合磁性分選 221
6.4.3二次分選法 222
6.5流式分選幹細胞 224
6.5.1流式分選造血幹細胞 224
6.5.2流式分選側群幹細胞 229
6.5.3流式分選間充質幹細胞 231
6.5.4流式分選腫瘤幹細胞 232
參考文獻 235
