《油菜原生質體融合後代穩定CMS系種質的細胞質變異研究》是管榮展為項目負責人，南京農業大學為依託單位的面上項目。
基本介紹
- 中文名：油菜原生質體融合後代穩定CMS系種質的細胞質變異研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：管榮展
- 依託單位：南京農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
利用原生質體融合可以創建細胞質雄性材料（CMS），但其機理有待研究。我們擬就此問題展開工作。已用油菜與播娘蒿原生質體融合雜種中的不育株，通過回交育成了一系列油菜穩定不育系，並發現其恢保關係不同於現有CMS系；已克隆分析了其99份穩定不育系的線粒體ORF222區域1800bp片斷，表明：由於早代mtDNA重組，導致每個不育系的該區域DNA序列都不同。在已經完成了這些工作的基礎上，本研究擬選取2個不育系（已找到相應恢復系），測序線粒體基因組，並且根據測序結果，克隆不育系mtDNA，尋找其它可能存在的高頻重組mtDNA位點，從而為通過原生質體融合創造CMS材料提供科學依據，為mtDNA遺傳和進化增添新內容。此外，工作還包括：分析線粒體基因差異表達，明確CMS相關基因；遺傳轉化候選基因，驗證功能；測交鑑定恢復系，標記定位恢復基因；觀察不育系形態學。預計發表SCI論文2-3篇，申報專利1項以上。
結題摘要
為研究油菜與播娘蒿體細胞雜種後代培育的雄性不育系，本研究開展了一系列研究工作：（1）觀察了N219A等不育系的形態，明確了新型細胞質雄性不育系的形態特徵。（2）提取了N219A的線粒體DNA，測序了線粒體基因組序列，長度為261.6 kb，含有33個編碼蛋白的基因、3個rRNA基因和17個tRNA基因。還完成了多個芸薹屬線粒體基因組的分析工作。用這些線粒體基因組分析了基因組重排，認為短片段重複序列介導了對N219A等線粒體基因組重排。（3）分析了N219A的位置功能ORF，並從ORF位置、ORF在不育系和保持系中的表達以及原核表達等方面，分析研究了細胞質雄性不育相關的候選基因。（4）對N219A等不育系的遺傳分析表明，不育性受一對基因控制，用SSR標記初步將恢復基因定位在A2染色體上。（5）取初花期花蕾，提取蛋白，對N219A不育系和保持系的作蛋白組學比較，鑑定得到了與物質能量代謝、細胞壁合成、細胞周期調控、細胞死亡等過程相關的差異表達蛋白，為進一步研究提供了基礎。研究發表了2篇SCI論文，累計影響因子8.2。
