《沉默基因Siglec-5的再激活及其抑制T細胞活化的分子機制》是依託陝西師範大學，由趙利軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：沉默基因Siglec-5的再激活及其抑制T細胞活化的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：趙利軍
- 依託單位：陝西師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
T細胞的異常活化是自身免疫性疾病發生的重要環節之一。Siglec-5分子在黑猩猩T細胞高表達並能抑制T細胞的過度活化，但在人類T細胞進化中表達沉默。我們發現了一個能激活人類T細胞Siglec-5表達的新分子，該分子是人T細胞淋巴樣增強因子（LEF-1）基因發生終止碼通讀翻譯後產生的通讀體。該通讀體含有一個能與Siglec-5 啟動子結合的HMG-BOX 功能域和兩個能與轉錄激活因子作用的LXXLL功能域。本項目擬採用DNA酶足跡法和染色質組裝技術研究該通讀體與Siglec-5啟動子的結合以及對染色質的活化作用；利用酵母雙雜交等方法研究與通讀體作用的轉錄激活因子進而闡明再激活Siglec-5的信號通路；採用基因突變等方法研究Siglec-5抑制T細胞活化的分子機制。本項目為研究人類T細胞異常活化及Siglec-5信號通路的表達調控提供了新的思路，並為治療自身免疫性疾病藥物的研發提供新的靶點。
結題摘要
項目的研究背景： 唾液酸結合免疫球蛋白樣凝集素(Siglecs)是一類以跨膜形式表達於免疫細胞表面的受體。Siglec-5 屬於CD33相關的一種Siglecs。人Siglec-5含有一個N-端Ig-V區和三個Ig-C2區以及C-端的ITIM/SAP的細胞內信號抑制調節區。Siglec-5主要表達在外周血單核細胞、中性粒細胞及B細胞，在T細胞表達沉默。Siglec-5的主要功能是抑制免疫細胞的活化，其表達水平的異常參與了免疫細胞功能失調及人類免疫功能紊亂相關疾病的發生與發展。 主要研究內容： 1．影響人Siglec-5表達的調控因子：本項目首先研究了人類轉錄因子LEF-1的通讀體對Siglec-5表達的激活作用，然後對人T細胞Siglec-5表達沉默的原因也從其啟動子甲基化修飾以及相關microRNA的機制上進行了研究。 2．全反式維甲酸(ATRA)及其受體(RXR)在Siglec-5表達調控中的作用研究：發現了Siglec-5的啟動子序列含有多個RXR的結合位點 （AGGTCA）；研究了RXR受體激動劑 ATRA及其衍生物對Siglec-5啟動子活性的影響；研究了這些化合物對U937中性粒細胞Siglec-5表達的影響。 3．ATRA及其衍生化合物調節Siglec-5在感染性免疫中的作用研究：研究了ATRA及其衍生化合物在中性白細胞對抗鏈球菌感染中的作用及機制，探討了這些化合物對肝硬化晚期白細胞Siglec-5表達以及細胞免疫功能的影響。 重要結果： 1．影響人Siglec-5表達的調控因子： 1．1．人類轉錄因子LEF-1的通讀體對Siglec-5表達具有一定的激活作用； 1．2．Siglec-5啟動子區的甲基化不明顯，但是存在著A＞G的轉換； 1．3．miR-34a在Siglec-5的表達沉默中起一定作用。 2．ATRA及其衍生物在Siglec-5的表達調節中作用明顯；ATRA作為RXR受體的反式激動劑抑制Siglec-5的表達； 3．ATRA通過抑制Siglec-5的表達增強了免疫細胞的呼吸爆發能力，同時減少了IL-6的產生;甲胎蛋白(AFP)具有增加Siglec-5表達的作用。 關鍵數據及其科學意義：ATRA抑制Siglec-5的表達增強了免疫細胞的抗感染作用，同時減少炎症損傷。本研究為ATRA抗感染及免疫紊亂相關疾病的治療提供了理論基礎。
