《水環境中腸道病毒滅活分子機理研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院,由李君文擔任項目負責人的重點項目。
基本介紹
- 中文名:水環境中腸道病毒滅活分子機理研究
- 項目類別:重點項目
- 項目負責人:李君文
- 依託單位:中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本項目將在前期研究的基礎上,採用Long-overlapping PCR技術、長探針與短探針交替Northern Blotting技術,並結合病毒細胞感染模型,對常用飲水消毒劑-氯作用於指示微生物-脊髓灰質炎病毒基因組5'非編碼區的敏感靶點進行精確定位,發現氯滅活脊髓灰質炎病毒的最佳靶點;然後,觀察其他常見飲水消毒劑或方法(二氧化氯、氯胺、臭氧、紫外線等)對水中常見病毒(A型肝炎病毒、柯薩奇病毒、誒柯病毒、輪狀病毒)基因組的最佳作用靶點,以發現消毒劑滅活病毒基因組的通用最佳靶點;最後,利用基因敲除病毒感染模型(人造病毒)技術確證消毒劑滅活病毒的通用最佳靶點,形成消毒劑滅活病毒基因組的最佳靶點假說,豐富和完善水中病毒滅活的分子機理學說。同時,建立基於最佳靶點假說的飲水消毒效果分子評價技術及新型飲水生物消毒劑研究技術平台。
結題摘要
本課題採用Long-overlapping PCR 技術、長探針與短探針交替Northern Blotting 技術,並結合病毒細胞感染模型,對氯、二氧化氯、臭氧、紫外線等消毒方法作用於脊髓灰質炎病毒(PV)、A型肝炎病毒(HAV)、腸道病毒71型(EV-71)、輪狀病毒(HRV)、腸道腺病毒41型(Ade41)、諾如病毒(NoV)基因組的敏感靶點進行定位,發現常用消毒劑(氯和二氧化氯)滅活腸道病毒(PV, EV71,HAV)優先作用靶點位於病毒基因組的5’非編碼區;而其他通過腸道傳播的病毒(HRV,NoV,Ade41)則無這一規律,最終形成了消毒劑滅活腸道病毒基因組的最佳靶點假說,豐富和完善水中病毒滅活的分子機理學說。同時,還建立了基於最佳靶點假說的RT-PCR和螢光定量PCR等飲水消毒效果分子評價技術,這些技術不僅靈敏度高、特異性強、重複性好,且與細胞培養法結果一致;最後,建立的基於消毒劑滅活病毒最佳靶點的抗脊髓灰質炎病毒感染的RNA干涉(siRNA)方法以及“先二氧化氯後氯低濃度消毒方法”為新型飲水消毒技術研究奠定了基礎。