《氫離子感受器GPR4在卵巢癌血管生成中的作用及機制探討》是依託西安交通大學，由任娟擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：氫離子感受器GPR4在卵巢癌血管生成中的作用及機制探討
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：任娟
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
卵巢癌死亡率高，療效差。血管新生對腫瘤發展必不可少，若能消除血管新生則可阻止腫瘤發展。血管新生常發生在組織缺氧時，缺氧時H+↑是啟動血管新生的重要因素。H+感受器可能與血管新生關係密切。我們首次發現磷脂受體GPR4對生理性血管新生異常關鍵，敲除GPR4後內皮細胞難以形成血管，但機制不清楚。近年來還發現GPR4是個H+感受器。另外腫瘤內H+常↑，我們推測GPR4也參與了腫瘤的血管生成，且促血管生成作用由其H+感受器功能所介導。本項目以卵巢癌為例，研究①GPR4是否參與了卵巢癌的血管生成；②敲除GPR4後能否抑制卵巢癌血管生成；③GPR4促卵巢癌血管生成作用是否由其H+感受器功能所介導。第一次將H+感受器與血管新生聯繫起來，目前尚無此方面報導。通過探索抑制H+感受器功能能否抑制腫瘤血管新生，為阻止腫瘤血管生成提供新思路和作用靶，對阻止腫瘤生長和血行轉移有重要意義，並深入明確腫瘤的血管生成機制。
結題摘要
主要研究發現： （一）.GPR4通過氫離子感受器功能調節內皮細胞的血管生成 在血管內皮細胞中GPR4可能通過氫離子感受器作用參與調節血管的生成。pH改變時細胞合成的cAMP顯著變化，cAMP又介導了VEGF變化。VEGF是最強的血管生成促進因子，因此GPR4可能通過氫離子感受器功能參與促進血管生成的。 （二）基因晶片檢測內皮細胞敲除GPR4基因後的基因組變化 成功構建了穩定敲除 GPR4的內皮細胞，cDNA晶片檢測基因表達譜變化， 明顯差異表達的基因有447個，其中129個基因在GPR4敲除細胞中上調,318個基因下調。這些基因涉及細胞調亡、細胞骨架及信號傳導、細胞增殖、分化及周期調控等方面。 （三）. Notch參與了GPR4對血管內皮細胞血管生成的調節 在血管內皮細胞HMEC-1中，轉染GPR4後Notch1的表達上調，內皮細胞形成血管狀結構增多、淋巴細胞跨內皮的遷移增多、內皮細胞產生的VEGF和 HIF-1α增多，再同時轉染入Notch1的siRNA或套用Notch 受體的抑制劑GSI-I後, GPR4介導的血管狀結構生成、淋巴細胞跨內皮遷移、VEGF和 HIF-1α產生都顯著受到抑制； （四）. GPR4參與了卵巢癌血管的生成 1. 卵巢癌中GPR4的表達水平遠高於良性卵巢腫瘤， GPR4的表達水平與微血管密度呈正相關，說明GPR4參與了卵巢癌中血管的生成。 2. 上皮性卵巢癌中GPR4的表達強度與腫瘤病理分級、組織學類型、是否有腹水無關，與淋巴結轉移，臨床分期有關。 （五）. Wnt/TCF7 參與了GPR4對卵巢癌細胞功能的調節，包括克隆形成率、侵襲、凋亡: 1. 在高表達GPR4的血管內皮細胞HMEC-1細胞中發現，Wnt通路的所有成員都表達，提示Wnt通路可能與GPR4的作用有關。 2. 比較了4種卵巢癌細胞系，發現卵巢癌細胞A2780的內源性GPR4表達水平最高，在A2780中敲除GPR4的表達後細胞在軟瓊脂上的克隆形成率降低、細胞侵襲性顯著降低、細胞發生凋亡、MMP2和MMP9表達水平下降。 3. A2780中套用TCF7的siRNA敲除TCF7後，A2780細胞A2780細胞在軟瓊脂上的克隆形成率降低、細胞侵襲性顯著降低、細胞發生凋亡、MMP2和MMP9表達水平下降。
