《構建無細胞轉錄-翻譯系統研究外切纖維素酶的合成機制》是依託山東大學,由高培基擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名:構建無細胞轉錄-翻譯系統研究外切纖維素酶的合成機制
- 項目類別:面上項目
- 項目負責人:高培基
- 依託單位:山東大學
- 批准號:39670005
- 申請代碼:C0102
- 負責人職稱:教授
- 研究期限:1997-01-01 至 1999-12-31
- 支持經費:10(萬元)
中文摘要
經聚合酶反應擴增得到外切纖維素酶I的基因在偶聯轉錄—翻譯的兔網織紅細胞系統中成功得到表達,產量達21微克/毫升。證實未經糖基化修飾的外切纖維素酶I仍具有原酶相近的活力和特異性。表明纖維素酶基因在無細胞體系中得到正確轉錄和翻譯。在建立的無細胞轉錄—翻譯系統中對不同碳源對外切纖維素酶I、II合成的調控機理在分子水平上進行了研究。發現碳源的調控發生在轉錄水平,外切纖維素酶I、II的合成均受纖維素的誘導和葡萄糖的阻遏、但槐糖只對木霉有誘導作用。凝膠阻滯試驗表明,木霉和麴黴外切纖維素酶基因啟動子上存在兩種不同的核酸基元各與細胞內的調控蛋白相互作用,以激活或阻遏纖酶基因的表達。