《植物乳桿菌素BM-1結構鑑定及抑菌機制研究》是依託中國農業大學，由郝彥玲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：植物乳桿菌素BM-1結構鑑定及抑菌機制研究
- 依託單位：中國農業大學
- 項目負責人：郝彥玲
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
目前，細菌素作為安全高效的天然生物抑菌劑，在食品保藏和抑菌類藥物開發等領域的套用受到了極大的關注。國外已對細菌素的構效關係和生物合成機制進行了深入研究，而國內尚未見報導。本項目擬以傳統肉製品中的植物乳桿菌所產耐酸耐鹼植物乳桿菌素BM-1為研究對象，對其理化特性（包括酶敏感性、酸鹼和熱的穩定性及抑菌譜）、分子量及其N端胺基酸序列進行分析；並利用分子生物學方法克隆該細菌素的結構基因，通過同源重組雙交換製備突變體結合超量表達互補實驗進行驗證；進而從敏感菌株的細胞變化（包括形態、生理生化、亞細胞結構）和細菌素一級結構與抑菌特性的關係兩個層面研究其抑制單核增生李斯特氏菌的機制。本項目的開展不僅為全面闡明此細菌素結構與功能關係奠定理論基礎，同時為具有自主智慧財產權的植物乳桿菌素BM-1的開發套用提供科學依據。
結題摘要
項目總體上是按照原進度計畫進行，研究進展順利；經費預算合理，支出基本是按照計畫進行；經過三年的研究，圓滿完成了課題的預期目標。發表3篇核心期刊文章，其中2篇被SCI收錄，培養了碩士生2名。取得成果主要體現在以下4個方面： （1）抑制單增李斯特氏菌乳酸菌菌株的篩選及其抑菌物質理化特性分析：從傳統肉製品中分離一株產抑制單增李斯特氏菌抑菌物質的植物乳桿菌BM-1，對抑菌物質的 理化特性、抑菌譜和抑菌方式等進行研究，進一步通過聚丙烯凝膠電泳和活性膠實驗初步確定其分子量。 （2）植物乳桿菌素BM-1的純化及其N端胺基酸序列分析：通過硫酸銨分級沉澱、和陽離子交換層析從植物乳桿菌發酵液中純化該細菌素，進一步利用ESI-FT-MS和 MALDI-TOF-MS測定細菌素的分子量和N端胺基酸序列。 （3）植物乳桿菌素BM-1基因簇中結構基因的分離鑑定：通過N端胺基酸序列分析推測細菌素BM-1是IIa類片球菌素，根據片球菌素的基因簇結構，利用PCR方法克隆細 菌素BM-1的基因簇，包括結構基因、免疫基因、ABC轉運蛋白和輔助蛋白。 （4）植物乳桿菌素BM-1抑菌機制的研究：一是利用定點突變技術確定片球菌素BM-1免疫蛋白的K46位點是活性發揮的關鍵位點；二是對片球菌素BM-1免疫蛋白對甘露 糖磷酸轉移酶受體識別特異性進行研究。
