《桑色素抑制產氣莢膜梭菌NetB活性的分子機制》是依託吉林大學，由王建鋒擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：桑色素抑制產氣莢膜梭菌NetB活性的分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王建鋒
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
產氣莢膜梭菌是雞壞死性腸炎的主要致病菌，一般在肉雞養殖抗生素休藥期內易發，嚴重威脅養雞業的健康發展。產氣莢膜梭菌致病因子較多，有文獻報導NetB可裂解腸上皮細胞並導致壞死性腸炎，是與雞壞死性腸炎直接相關的重要毒力因子。本課題組前期研究中已在國內分離到多株致病性產氣莢膜梭菌，並擴增到NetB編碼基因，進一步實現了NetB的原核表達和純化，根據NetB成孔活性過程中其空間構象變化特性，進行了抑制劑的篩選並獲得了多種有效天然化合物，其中以桑色素抑制活性最強。在此基礎上，本項目擬通過化學生物學相關實驗闡明桑色素和NetB相互作用的分子機制；細胞感染實驗和實驗動物感染實驗分別在體內外驗證桑色素對產氣莢膜梭菌感染的防治作用，以期為防治雞壞死性腸炎，尤其是休藥期內雞壞死性腸炎的新藥研發提供新的策略和先導化合物。
結題摘要
產氣莢膜梭菌是雞壞死性腸炎的主要致病菌，一般在肉雞養殖抗生素休藥期內易發，嚴重威脅養雞業的健康發展。產氣莢膜梭菌致病因子較多，有研究表明NetB、IV型菌毛系統、PFO和α毒素等在細菌感染過程中發揮著不可或缺的作用，是抗產氣莢膜梭菌感染藥物研發的重要潛在靶標。本項目以上述毒力因子或IV型菌毛系統為靶標，通過溶血試驗、細菌滑行運動試驗和生物被膜形成抑制試驗，發現桑色素、鳶尾黃素和穗花山雙黃酮等天然化合物在無抗菌活性濃度範圍內可有效抑制上述毒力因子或IV型菌毛系統生物學功能，在細胞與細菌共培養感染系統中，加入活性抑制劑顯著降低細菌對宿主細胞的粘附作用及其對宿主細胞介導的細胞毒性作用；在小鼠或肉雞感染模型中，經活性抑制劑治療後，可有效降低產氣莢膜梭菌致病力。另外，本項目通過化學生物學試驗、定點參加突變和螢光淬滅等試驗闡明和確證了活性抑制劑與靶蛋白互作機制，發現抑制劑主要結合於靶蛋白活性中心位點，阻礙靶蛋白與其底物結合而降低靶蛋白生物學活性。綜上，本項目為產氣莢膜梭菌感染，尤其是休藥期內雞壞死性腸炎的新藥研發提供新型綜合策略和先導化合物。
