核苷類藥物細胞內磷酸化過程的動力學研究

《核苷類藥物細胞內磷酸化過程的動力學研究》是依託中南大學，由余鵬擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：核苷類藥物細胞內磷酸化過程的動力學研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：余鵬
• 依託單位：中南大學

項目摘要

核苷類藥物在抗病毒、抗腫瘤治療等方面有廣泛套用。該類藥物在體內都存在細胞內磷酸化活化的過程，其臨床療效及嚴重毒副作用大都與細胞內磷酸化後的活性成分濃度相關。然而，當前的核苷類藥物藥動學研究結果多基於血樣內的無活性成分，或僅在個體水平上對磷酸化成分濃度變化進行簡單、表淺的比較分析，忽視了核苷類藥物細胞內磷酸化過程的複雜性及其對藥物作用強度的重要影響。可見，對核苷類藥物細胞內磷酸化動力學過程進行重點考察，對臨床上安全合理使用該類藥物有重要意義。為此，本項目選擇齊多夫定在犬外周血單核細胞內的磷酸化、恩替卡韋在大鼠肝細胞內的磷酸化過程為研究模型，以藥物在效應細胞內磷酸化物濃度變化為動力學研究對象，將傳統的藥動學公式和理論等，延伸到更為微觀和直接的細胞層面。本項目將建立核苷類藥物細胞內磷酸化的動力學模型，並以此來揭示原形藥物藥動學與磷酸化活性成分藥動學間的關聯性。

結題摘要

核苷類藥物在抗病毒、抗腫瘤治療等方面有廣泛套用。該類藥物在體內都存在細胞內磷酸化活化的過程，其臨床療效及嚴重毒副作用大都與細胞內磷酸化後的活性成分濃度相關。本研究主要著重於齊多夫定、恩替卡韋在體外細胞培養體系和體內效應組織細胞內的磷酸化過程的動力學研究。結果發現，齊多夫定在體外細胞培養體系和人外周血單核細胞內均發生磷酸化，生成齊多夫定一、二、三磷酸化物，其中一磷酸化物是主要的磷酸化產物。血漿內齊多夫定原藥的半衰期時間較短，而細胞內各磷酸化物的半衰期較長，通過實驗數據證明了現有血藥藥動學數據的不足。本研究首次建立了恩替卡韋磷酸化在HepG2細胞及肝組織勻漿樣本內的LC-MS/MS測定方法，並對其生物樣本的穩定性進行了考察。恩替卡韋在HepG2細胞培養體系中可發生磷酸化反應，同時生成恩替卡韋一、二、三磷酸化物，且各磷酸化物的蓄積量在一定範圍內與細胞外藥物濃度呈正相關。恩替卡韋在大鼠肝組織內的磷酸化產物與其在體外細胞實驗中的產物一致，且磷酸化物的半衰期較原藥稍短。原藥與各磷酸化物的藥物暴露參數相關性研究結果顯示，齊多夫定、恩替卡韋原藥的藥物暴露參數與其效應組織細胞內的活性磷酸化物相關性良好，故本研究可實現通過原形藥物濃度預測各磷酸化物在效應細胞內的暴露情況，從而推斷藥物的治療效應。本研究共發表科技論文7篇，被錄用1篇，其中SCI收錄4篇，CSCD收錄2篇，同時獲得實用新型專利一項。另外向SCI源期刊投寄論文3篇。