《核仁素對熱變性成纖維細胞自噬的影響及其機制研究》是依託中南大學，由梁鵬飛擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：核仁素對熱變性成纖維細胞自噬的影響及其機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：梁鵬飛
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
變性真皮的轉歸機制仍是燒傷創面修復研究的熱點。核仁素具有多生物學功能，申請者在前一個課題中發現核仁素在皮膚成纖維細胞熱損傷轉歸中起著顯著促修復作用，但其促修復機制尚不得而知。最近申請者發現熱變性皮膚成纖維細胞轉歸中伴有自噬增多，與核仁素的表達存在一定相關性，而核仁素低表達可抑制自噬的發生，提示核仁素可能是重要的自噬調控分子，其可能通過調控自噬發生從而發揮促修復作用。本項目擬在上述研究的基礎上，從整體及細胞水平探討熱變性皮膚成纖維細胞修復中自噬發生情況及其生物學意義；採用基因轉染和RNA干擾技術探討核仁素對皮膚成纖維細胞自噬的影響；採用RNA凝膠滯留實驗、紫外交聯、蛋白質-RNA免疫共沉澱、mRNA穩定性、報告基因分析及基因突變等方法深入探討核仁素對自噬相關基因的調控機制。開展本項目有助於闡釋核仁素對皮膚成纖維細胞熱損傷轉歸中自噬的影響及其機制，為深度燒傷創面的治療提供新的思路和實驗線索。
結題摘要
變性真皮是指深度燒傷創面上雖然發生了組織細胞新陳代謝障礙、細胞功能降低，待創面局部環境改善後能恢復正常形態和功能的那部分真皮。變性真皮中包含成纖維細胞、血管內皮細胞兩種主要的創面修復細胞，深入了解創面修復細胞在燒傷創面修復過程中的作用，對於進一步認識創面修復過程具有重要意義。細胞自噬是一種廣泛存在於真核細胞中的生命現象。然而自噬是否在細胞熱變性恢復過程中發揮作用，尚不清楚。 本項目的研究內容包括：（1）自噬在熱變性成纖維細胞恢復過程中的作用；（2）自噬在熱變性內皮維細胞恢復過程中的作用；（3）變性真皮與正常皮膚中LncRNA、mRNA的差異表達；（4）XIST/miR-29a/LIN28A信號在變性成纖維細胞恢復過程中的作用。 研究發現：（1）熱變性皮膚成纖維細胞恢復過程中，核仁素的表達增加、自噬增強，核仁素可以調控熱變性成纖維細胞自噬的發生，進一步研究發現核仁素直接調控自噬基因Bnip3、ATG5的表達，進而增強熱變性成纖維細胞的恢復能力。（2）熱變性內皮維細胞恢復過程中，自噬以時間依賴的方式增加，自噬進而促進內皮細胞增殖、遷移及血管生成，進一步研究發現：熱變性內皮細胞通過激活AMPK/Akt/mTOR信號通路激活細胞自噬的發生，進而促進熱變性內皮細胞形成血管。（3）與正常皮膚比較，在變性真皮中獲得差異表達的lncRNAs4604個，其中表達上調的有2587個，表達下調的有2017個；獲得了差異表達的mRNAs 2799個，其中表達上調的有857個，表達下調的有1942個。生物信息學進一步分析示：與miRNA-199a-5p存在反應元件的lncRNAs245個和mRNAs175個。（4）XIST通過競爭性結合miR-29a影響LIN28A的表達，進而調控熱變性成纖維細胞的增殖、遷移及細胞外基質的合成，並促進變性真皮的恢復。 上述研究為燒傷創面修復以及保留變性真皮與整張自體薄中厚皮片移植技術，提供了理論依據。
