《新型IMAC法分離和富集植物磷酸化蛋白組》是依託中國農業大學，由任雪芹擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型IMAC法分離和富集植物磷酸化蛋白組
- 依託單位：中國農業大學
- 項目負責人：任雪芹
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
磷酸化蛋白質組學的研究包括磷酸化蛋白的識別、序列測定、磷酸化位點定量與特定激酶的關係等方面，就目前的研究狀況來看，有關動物和人類疾病的磷酸化蛋白質組學研究遠遠多於植物在該領域的研究，植物磷酸化蛋白質組學領域的研究非常有必要，但是由於蛋白豐度低、干擾多，植物磷酸化蛋白組的研究同時也有很大挑戰性。 因此，本課題將重點研究新型IMAC材料的製備、標準蛋白以及在玉米和擬南芥植物磷酸化蛋白分析中的套用。首先通過選取聚乙烯醇、纖維素等高分子材料做為IMAC的基質，將功能基團-COOH，-PO43-引入基質中，篩選出適於分離富集的金屬配體離子和相應的吸附-解吸附緩衝液，通過新型材料和緩衝液的研究，進一步提升該方法的富集效果，彌補目前材料選擇性低、專一性不足、耐鹽性差的問題，提高IMAC性能，使其更加適合複雜樣品的分析和鑑定，最終將它套用到玉米和擬南芥的各部分組織磷酸化蛋白質組的研究
結題摘要
IMAC材料的作為一種簡單有效的分離蛋白質的方法，在磷酸化蛋白組的分離與富集方面有著十分重要的意義。本項目的首先以合成高分子和天然高分子作為IMAC基質材料，篩選合適的配體金屬離子，製備了新型的Ti4+-IMAC材料；然後將改性後的材料進行一系列的物理、化學表征，如ATR-IR、SEM、AFM等，進行一系列以及針對植物磷酸化多肽吸附、解吸附的特異性、選擇性和靈敏度等的研究，考察不同的緩衝體系中表現；最後將其套用到真實複雜生物樣品，即玉米和擬南芥磷酸化蛋白組的研究。該研究為水稻與鹽脅迫回響機制之間的研究提供了新視角，對於磷酸化蛋白與鹽脅迫之間關係得到進一步的功能分析，更好地揭示了植物抵抗外界環境脅迫的生理過程。
