《新型血小板受體CLEC-2維持腦血管完整性的機制研究》是依託蘇州大學，由傅建新擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型血小板受體CLEC-2維持腦血管完整性的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：傅建新
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
血腦屏障在維持腦血管完整性及其功能方面發揮重要作用，但血腦屏障在胚胎髮育期形成不完整，因此胚胎期腦血管完整性如何保持機制尚不清楚。我們前期研究顯示一種新的血小板活化受體CLEC-2在維持胚胎髮育期腦血管完整性發揮重要作用。CLEC-2及其配體PDPN基因敲除的小鼠出現生髮層基質出血，這一表型與早產兒腦生髮基質出血極為相似，提示PDPN和CLEC-2相互作用是保護胚胎髮育期腦血管完整性的重要機制。本項目將運用動物模型進一步研究：（1）血小板CLEC-2在維持胚胎髮育期大腦血管完整性的功能和機制；（2）腦組織中何種細胞表達PDPN並研究其在維持腦血管完整性方面作用機制；（3）是否CLEC-2信號通路介導血小板釋放S1P而維持腦血管完整性。本研究將提出血小板維持胚胎期腦血管完整性的全新機制，並為胚胎期腦血管完整性的維持及早產兒腦出血的發生機理和治療新靶點的研究打下基礎，具有巨大的基礎和臨床意義。
結題摘要
腦室內出血(IVH)是早產、低體重兒最常見的併發症之一，發生率可達35%。因此，深入研究調控胚胎髮育期腦血管完整性的分子機制將為積極預防和有效治療早產兒IVH提供科學依據。血小板數量及/或功能異常是導致新生兒腦出血的主要誘因，但在胚胎髮育過程中血小板如何參與、維護腦血管完整性尚缺乏機理研究，其中的一個重要原因就是缺乏有效的動物模型。本課題組利用基因敲除技術成功構建了新型血小板活化受體C-型凝聚素樣受體2(簡稱CLEC-2)及其配體平足蛋白基因缺陷小鼠，並發現兩種基因缺陷小鼠在胚胎髮育期均出現嚴重的腦出血表型，部分存活至成年的小鼠發生腦積水，其臨床表現及病理特徵與早產新生兒的IVH極為相似，不但表明平足蛋白—CLEC-2信號軸介導的血小板活化是維持胚胎髮育期腦血管完整性的重要機制，也為深入研究早產兒IVH的分子病理機制及干預策略提供了有效、可靠的動物模型。為深入研究平足蛋白—CLEC-2信號軸調控腦血管完整性的分子機理，課題組建立了條件性基因敲除小鼠模型並證實神經祖細胞表達的平足蛋白是一種新的血小板激活劑，可通過CLEC-2信號活化從新生、不成熟的血管滲漏的血小板，進而在胚胎腦組織中誘導血小板釋放反應並保護內皮屏障。利用體外細胞模型，課題組發現CLEC-2信號活化血小板可釋放血管保護生物活性介質，如1-磷酸鞘氨醇(S1P)和血管生成素-1，並可通過抑制VE-鈣粘蛋白內吞從而保護內皮完整性；更為重要的是，通過母體給予選擇性S1P受體1(S1PR1)激動劑部分保護CLEC-2缺陷小鼠胚胎的腦出血表型，提示S1P信號途徑在胚胎髮育階段參與維護腦血管屏障。本研究有助於闡明IVH發生、發展的分子機制，為我們在後續工作中開展IVH及其它出血性疾病的防治奠定堅實的基礎。
