新型脫細胞牙周膜片用於牙周組織再生相關研究

《新型脫細胞牙周膜片用於牙周組織再生相關研究》是依託四川大學，由楊波擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：新型脫細胞牙周膜片用於牙周組織再生相關研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：楊波
• 依託單位：四川大學

項目摘要

牙周組織是牙齒髮揮功能的基礎，如何再生牙周組織並恢復其功能一直是學者們致力解決的難點問題。本項目前期研究證實利用脫細胞牙本質與牙囊細胞膜片能夠再生牙骨質-牙周膜樣複合體。然而，再生組織與正常牙周組織在結構及排列方式上存在一定程度的差別，其原因在於支架材料缺乏牙周膜的天然三維形態結構及細胞外基質。脫細胞技術的發展有望為牙周組織再生提供新的研究思路。本項目前期構建了脫細胞牙本質及脫細胞牙髓支架，保留了大量細胞外基質和生長因子，複合牙源性幹細胞能夠再生牙本質及牙本質-牙髓複合體。基於此，本課題擬構建脫細胞牙周膜片支架材料，進行牙周組織再生相關研究。本研究試圖闡述脫細胞牙周膜片對牙源性幹細胞牙向誘導分化的影響，並在小型豬體內驗證脫細胞牙周膜片用於牙周組織再生的可行性，這一目標的實現有望為臨床牙周再生提供新的治療策略，同時也為生物牙根和其他組織器官的再生提供新思路。

結題摘要

牙周支持組織的喪失將導致牙齒鬆動脫落，進而影響發音和進食，影響人們的身心健康。目前牙周病的治療主要採用清創式的治療方案，喪失的牙周組織及牙槽骨不能恢復至原有水平，雖然臨床上利用人工骨粉充填來恢復牙槽骨水平，但效果並不理想。生物醫學的發展為牙周病的治療帶來新希望，有望為牙周組織再生提供新的研究手段。脫細胞技術是近年來發展較快的組織工程技術，目前已被廣泛套用於心臟、角膜、肝臟、腎臟、皮膚等組織的再生，部分研究成果已用於臨床疾病的治療，具有廣闊的套用前景。本項目在這一背景下，構建脫細胞牙周組織膜片支架材料，複合牙源性幹細胞探究其牙周組織的可行性及有效性研究。本項目分離了牙周組織並誘導其形成牙周組織膜片，成功探索出牙周組織膜片脫細胞方法的最佳方案：0.5% Triton X100處理15分鐘、Ca+、Mg+催化的DNase酶處理30分鐘。利用此方法獲得的脫細胞牙周組織膜片具有較好的強度和韌性並較好的保存了牙周組織細胞外基質。進一步研究顯示，牙囊細胞可在脫細胞牙周膜片上粘附，並沿脫細胞處理後餘留的牙周膜細胞胞外基質的方向伸展，且接種在脫細胞牙周膜片上的牙囊細胞較培養在普通培養皿中的牙囊細胞具有更快的增殖速率，共培養1周后的Q-PCR的結果顯示經脫細胞牙周膜片誘導的牙囊細胞表達成牙相關基因如CAP、BSP、DSP、COLI、COLIII、FN、ALP、OCN均高於對照組，其中ALP、OCN等成骨相關標記物的表達顯著升高，表明脫細胞牙周膜片具有成牙誘導能力，能誘導牙源性幹細胞牙向分化及成骨向分化。最後，在比格犬牙周缺損的體內移植中，與牙周細胞膜片的對照組相比，脫細胞牙周膜片組更好的恢復了牙周缺損模型中牙槽骨的高度，並觀察到了更多的新生牙槽骨及含有血管、神經的排列緻密、有序的牙周纖維組織形成。以上結果表明新型脫細胞牙周組織膜片用於牙周組織再生是可行的、有效的，這一研究成果為牙周組織再生及生物牙根的構建提供了新思路，有望開闢傳統牙周病及牙缺失治療的新模式。