新型冠狀病毒(2019-nCoV)抗體檢測試劑盒用於快速定性檢測人類全血、血清、血漿中的新型冠狀病毒IgM/IgG抗體，最快可在15分鐘內肉眼觀察獲得檢測結果。
基本介紹
- 中文名：新型冠狀病毒(2019-nCoV)抗體檢測試劑盒
- 外文名：New Coronavirus (2019-nCoV) Antibody Detection Kit
- 管理類別：Ⅲ類醫療器械
抗體檢測優勢,分類,檢測原理,各種檢測方法的特點,適用範圍,操作步驟,標本運輸,注意事項,臨床意義,參考文獻,
抗體檢測優勢
1.與核酸聯合檢測提高檢出率。
2.採樣的問題可能使核酸檢測出現假陰性的情況，抗體檢測採樣較均一。
3.抗體檢測有效幫助提高疑似病例的確診率。
4.實驗室要求低，利於各級醫院廣泛展開。
5.流行病學研究提供支持數據。
分類
按檢測原理不同分為以下四類：
3. 新型冠狀病毒 IgM/IgG 抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）
4. 新型冠狀病毒 IgM/IgG 抗體檢測試劑盒（化學發光法）
檢測原理
（以IgM抗體為例）
1.膠體金法（以間接法為例）
新型冠狀病毒(2019-nCoV)IgM抗體檢測試劑盒（膠體金法）的檢測原理是膠體金標記鼠抗人IgM，同時硝酸纖維素膜上包被新型冠狀病毒抗原，利用膠體金免疫層析間接法的原理達到檢測人血清中新型冠狀病毒IgM抗體的目的。
2. 螢光免疫層析法
新型冠狀病毒IgM抗體檢測試劑盒（螢光免疫層析法）的原理是基於乾式螢光標記技術和免疫層析技術，採用全血、血清或血漿作為樣本，配套全自動螢光免疫定量分析儀，全自動穿刺進樣，實現“樣本進、結果出”，最大程度避免產生氣溶膠，降低對操作者和環境污染風險。
3. 酶聯免疫法（以捕獲法為例）
新型冠狀病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）的原理是套用捕獲酶聯免疫吸附分析法，採用抗人IgM單克隆抗體包被反應板，加入校準品或稀釋後的樣品，樣品中的病毒IgM抗體與已包被的單克隆抗體結合形成抗人IgM抗體-IgM抗體複合物，洗滌後加入HRP標記的2019-nCoV N蛋白抗原（E蛋白抗原或S蛋白抗原），形成抗人IgM抗體-IgM抗體-2019-nCoV N蛋白抗原-HRP複合物。洗板後加入TMB底物，複合物上連線的HRP催化底物生成藍色物質，加入終止液後變成黃色，在450nm波長處有特異吸收峰。通過峰值高低對人血清中的2019-nCoV IgM抗體進行定性檢測。
4. 化學發光法（以間接法為例）
新型冠狀病毒抗體檢測試劑盒（化學發光法）的原理是高科技材料磁珠標記病毒的重組蛋白，用於結合血液樣本中的病毒抗體IgM，再使用二抗來識別抗體。二抗上面偶聯了鹼性磷酸酶，加入底物後會產生光信號，化學發光儀器通過高靈敏度的PMT（光電倍增管）來檢測光子，從而實現pg(皮克)級別的高靈敏度檢測。
各種檢測方法的特點
膠體金法操作便捷，可直接目視判讀，一般15分鐘左右即可完成檢測；免疫螢光層析法與膠體金法一樣操作便捷，檢測迅速，但需要儀器判讀；酶聯免疫法可採用常規酶標儀判讀，一般靈敏度較高，但檢測時間較長（約1.5小時左右），而且操作步驟較多，操作過程中應採取措施避免感染。化學發光法一般靈敏度亦較高，採用全自動化學發光免疫分析儀，無需過多手工操作即可完成檢測，檢測時長一般約半小時。
適用範圍
用於體外定性檢測人血清、血漿和靜脈全血樣本中新型冠狀病毒（2019-nCoV）IgM/IgG抗體。僅用作對新型冠狀病毒核酸檢測陰性疑似病例的補充檢測指標或疑似病例診斷中與核酸檢測協同使用，不能作為新型冠狀病毒感染的肺炎確診和排除的依據，不適用於一般人群的篩查。僅限醫療機構使用。
操作步驟
（以國械注準20203400240為例）
(1) 取出試劑盒，室溫平衡20~30分鐘。
(2) 滴加血清或血漿樣本10μL，滴加全血樣本20μL於反應孔中，待液體充分吸入。
(3) 滴加樣本稀釋液2滴於反應孔中，待液體充分吸入。
(4) 1-15分鐘可判讀結果。
陽性結果：檢測開始後1-15min，檢測卡C線和T線位置均出現條帶。
陰性結果：15min內僅有檢測卡C線位置出現條帶，T線位置不出現條帶。
無效結果：15min內檢測卡C線和T線位置均不出現條帶或僅T線位置出現條帶，C線位置不出現條帶。
標本運輸
1. 院內運輸
包裝：標本採集後用1000mg/L含氯消毒液對標本容器外表面進行擦拭或噴灑消毒，然後放入帶有生物安全警示標識的專用標本自封袋中包裝，並對自封袋外表面用1000mg/L含氯消毒液進行消毒，然後置於專用密閉轉運箱，並對轉運箱外表面用1000mg/L含氯消毒液消毒。
運送：由經過生物安全培訓的專人運送至實驗室，運送人員應佩戴帽子、一次性外科口罩、手套、隔離衣，轉運期間保持轉運箱平穩，避免劇烈震盪、顛簸。
2．院外運輸
應按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規定》（衛生部令第45號）要求執行。依據國家《新型冠狀病毒感染的肺炎實驗室檢測技術指南》標準，新型冠狀病毒毒株及其他潛在感染性材料的運輸包裝分類屬於A類，對應的聯合國編號為UN2814，包裝材料應符合PI602分類包裝要求。
注意事項
1. 採集標本時不能攝取食物或吸菸。要戴一次性手套，之後要洗手。
2. 抗體檢測試劑盒對濕度非常敏感，要注意濕度引起的功能下降。
3. 取出試劑時要避免手或其他異物接觸到檢測線部位。
4. 在結果判斷時，要注意反覆凍結或溶解可能帶來假陰性或假陽性結果。
臨床意義
1.IgM、IgG類抗體是人體感染新冠病毒後產生的免疫防禦蛋白，IgM抗體產生早，一經感染，快速產生，維持時間短，消失快，血液中檢測陽性可作為早期感染的指標，可用於感染的早期輔助診斷。
2. IgG抗體產生晚，維持時間長，消失慢，血液中檢測陽性可作為感染和既往感染的指標。
3.血清新型冠狀病毒特異性IgM抗體和IgG抗體陽性；血清新型冠狀病毒特異性IgG抗體由陰性轉為陽性或恢復期較急性期4倍及以上升高”為確診病例的血清學依據。
參考文獻
[1] Chan JF, Kok KH, Zhu Z, et al.Genomic characterization of the 2019 novel human-pathogenic coronavirusisolated from a patient with atypical pneumonia after visiting Wuhan[J]. Emerg Microbes Infect, 2020, 9(1): 221-236.
