《新型α-N-乙醯半乳糖胺酶酶解紅細胞A型抗原的機理研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由高紅偉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：新型α-N-乙醯半乳糖胺酶酶解紅細胞A型抗原的機理研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：高紅偉
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
α-N-乙醯半乳糖胺酶（NAGA）是一種糖水解酶，可將A型紅細胞（A RBC）轉變為通用O型紅細胞(O RBC)，但大多NAGA只能將A2 RBC轉變成O RBC，無法將A1 RBC轉變成O RBC。最近我們克隆表達了一種新型NAGA，可將A1、A2 RBC都轉變為O RBC。但這種新型NAGA水解A型抗原的機理尚不清楚。如NAGA如何既作用於A抗原又作用於複雜的A1抗原？NAGA是否具備內切酶活性？NAGA酶解轉變形成的O RBC(A-ECO RBC)的抗原結構是否與O RBC一致？是否暴露了新抗原表位（比如3型H抗原）？本課題將通過研究上述問題，明確NAGA的作用機理和A-ECO RBC的抗原特性。這一研究將為A-ECO RBC臨床套用的安全性提供科學依據。
結題摘要
腦膜膿毒性金黃桿菌來源的α-N-乙醯半乳糖胺酶（NAGA）是一種糖水解酶，既可將含A抗原的A2 型紅細胞（RBC）酶解轉變成通用O型紅細胞(A2 ECO RBC)， 又能將含複雜A1抗原的A1 RBC轉變為A1 ECO RBC。NAGA如何既作用於A抗原又作用於複雜的A1抗原，NAGA是一種外切酶還是一種兼具內切和外切酶活性的新型糖苷水解酶是本項目需要解決的關鍵科學問題；另外A ECO RBC的抗原結構是否與O RBC一致，在臨床上套用的安全性如何也是本項目需要回答的另一科學問題。 本項目通過對NAGA酶解A1 RBC獲得的寡糖成分的分析，證實了產物為單糖N-乙醯半乳糖胺，流式結果證明A1 ECO RBC表面含有大量的3-H抗原，從而明確了a-N-乙醯半乳糖胺酶為外切酶，切掉A1型紅細胞糖鏈末端的N-乙醯半乳糖胺將紅細胞上的3型A抗原變成了3型H抗原。通過對紅細胞洗滌機程式及耗材的改進建立了自動化製備ECO RBC的方法。通過對酶解轉變的紅細胞包括A ECO RBC，B ECO RBC，AB ECO RBC進行的結構功能及安全性評價，發現血型轉變對紅細胞的結構功能沒有明顯的影響，交叉配血實驗證實B ECO RBC是安全的，但A ECO RBC，AB ECO RBC因為與O血清和B血清凝集的比例較高目前尚不能作為通用型RBC在臨床上使用。
