《整合素激活c-Src的機制及其在血栓中的套用研究》是依託上海交通大學，由蒙國宇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：整合素激活c-Src的機制及其在血栓中的套用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：蒙國宇
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Integrin介導的c-Src活化和血栓的形成、腫瘤細胞的遷移相關聯。一般情況下，c-Src由其SH3結構域和富含脯氨酸的蛋白序列結合而活化。Integrin利用其胞內C末端的RGT來激活c-Src。由於結構數據的缺失，RGT如何結合SH3，又如何激活c-Src，是有待於解決的問題。最近，我們報導了解析度達2.0埃的SH3:RGT複合物晶體結構（Xiao et al, Blood, 2012）。結構顯示，RGT結合在SH3的N-Src loop。體內外的功能實驗表明，N-Src loop的突變，將影響RGT和SH3的結合以及integrin介導的c-Src活化。我們提出了新的非經典的c-Src的活化機制模型。本計畫書的研究目標是，利用結構生物學手段，並結合斑馬魚模型，進一步闡明integin激活c-Src的調控機制，同時尋找和設計可以套用在臨床上的小分子靶向藥物。
結題摘要
整合素介導的c-Src活化與血栓的形成、腫瘤細胞的遷移密切相關。c-Src通常由其SH3結構域和富含脯氨酸的蛋白序列的結合而活化。整合素β3亞基利用其胞內C末端的RGT來激活c-Src。由於結構數據的缺失，RGT如何結合SH3，又如何激活c-Src，是有待於解決的問題。基於我們已解析的SH3:RGT複合物晶體結構(Xiao et al, Blood, 2013)，我們提出新的非經典的c-Src的活化機制模型，RGT結合位點處於SH3的“N”-Src loop上。在本項目中，我們進一步證明整合素β3和c-Src之間相互作用關係與它們的結構密切相關，RGT與SH3的結合打破了原有三者之間作用力的平衡，啟動了c-Src活化的第一步。該發現對研發針對血栓和抑制腫瘤細胞遷移的新型藥物有重要指導作用。結構信息提示RGT多肽中R的側鏈非常重要，我們對多肽RGT中的R胺基酸進行改造，並檢測改造後的多肽對c-Src的SH3功能域相互作用及對c-Src酶活性的影響。結果發現，Arg突變成Lys可以明顯增強藥物與SH3的結合，提示Arg的長鏈和其柔軟度可能是日後藥物改造的方向。我們正通過晶體衍射學獲得c-Src與RGT衍生物的複合物結構，進一步鞏固我們的Src激活理論基礎和進一步循環最佳化藥物。 同時，在血液病靶點蛋白和感染性疾病相關蛋白的結構生物學研究中，我們成功解析了白血病靶點蛋白PML-RARα的四聚體三維結構(Wang et al, Nature Communication, 2017)，為白血病治療和預後提供新的結構生物學理論基礎；成功獲得單個SafD以及三個連續亞基SafDAA的高解析度蛋白結構(Zeng et al, eLife, 2017)，證明細菌通過胞間粘附分子寡聚促進生物被膜形成是一種普遍現象，為沙門氏菌防治提供精細的靶點蛋白結構視野，為當今全球抗生素耐藥加劇問題的解決提供嶄新的思路。
