《改造乙型腦炎病毒作為神經環路示蹤工具的探索性研究》是依託中國科學院精密測量科學與技術創新研究院，由賈凡擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：改造乙型腦炎病毒作為神經環路示蹤工具的探索性研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：賈凡
- 依託單位：中國科學院精密測量科學與技術創新研究院
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
神經環路的結構和功能是神經科學的基本問題。近年來，嗜神經病毒以其獨特的優點成為神經環路結構研究的重要工具，但存在毒性大、安全性低、製備方法複雜、感染效率低等問題，在一定程度上限制了相關研究。申請人擬利用多年的病毒學研究經歷，針對上述問題，以具有嗜神經、毒性低、安全性高、製備過程簡捷等特點的乙型腦炎病毒疫苗株為對象，採用病毒反向遺傳、螢光顯微成像、免疫組化等技術，分別建立可實現外源蛋白表達、跨單級和多級突觸的新型示蹤工具系統：（1）構建具有單次感染性的病毒樣顆粒，建立快速表達外源蛋白的輔助工具病毒；（2）構建缺失結構蛋白基因的複製子，結合狂犬病毒和水泡性口炎病毒膜蛋白介導病毒定向跨突觸的特性，建立特異逆行、順行跨單級突觸的迴路示蹤體系；（3）構建帶有螢光蛋白基因的重組乙型腦炎病毒，建立跨多級突觸的迴路示蹤工具。該系統既可用於非靈長類和靈長類動物的神經環路標記，也可用於病毒疫苗和藥物篩選等方面的研究
結題摘要
神經環路的結構和功能是神經科學的基本問題。近年來，嗜神經病毒以其獨特的優點成為神經環路結構研究的重要工具。乙型腦炎病毒能感染嚙齒類和靈長類神經細胞細胞，因此具備開發為標記嚙齒類，尤其是嚙齒類神經環路的工具的潛力，因此，製備可視化的重組乙型腦炎病毒是本項目的核心。在重組病毒的製備過程中，發現其不能穩定攜帶綠色螢光蛋白基因，這也是目前沒有可視化乙型腦炎病毒的原因。因此，採取了一系列篩選方法，鑑定出一個適應性突變，其能使重組病毒穩定攜帶綠色螢光蛋白基因。通過一系列體外和體內的分析實驗，表明其能點亮被標記的神經細胞。目前獲得的數據對於下一步分析其標記鼠腦和猴腦神經和神經網路的特性具有十分重要的意義。
