《擴張皮膚再生關鍵蛋白的篩選及功能鑑定》是依託上海交通大學，由盛玲玲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：擴張皮膚再生關鍵蛋白的篩選及功能鑑定
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：盛玲玲
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
通過組織擴張術獲取大面積新生皮膚進行修復重建是目前整形外科常用的方法。由於皮膚的再生能力有限，獲取大面積新生皮膚往往需要6-8個月的時間。這么長的擴張時間使得併發症的發生率大大增加，如感染、擴張器破裂、皮膚發紅變薄甚至壞死等。提高皮膚的再生能力是解決這個問題的關鍵。那么，明確機械張力誘導皮膚再生的機制，確定關鍵調節因子，進行有針對性的干預，就可以有效地提高皮膚的再生能力，縮短擴張時間。所以，本研究擬藉助於近年來流行的差異蛋白組學法，尋找擴張皮膚組織和未擴張皮膚組織之間的差異蛋白，進一步行生物信息學分析及體內外實驗驗證，最終確定調節擴張皮膚再生的關鍵蛋白，破譯擴張皮膚再生的“密碼”。該研究結果不僅有助於加深對擴張皮膚再生機制的認識，還可以尋找到新的干預靶點，為臨床治療提供實驗依據。
結題摘要
組織擴張術的本質是由機械張力刺激引起的皮膚再生。明確機械張力引起皮膚再生的機制，尤其是其中的關鍵調節因子，則有望通過有針對性的治療提高皮膚的再生能力，從而提高擴張效率，減少擴張過程中的併發症。本研究擬採用近年來廣泛套用的差異蛋白組學技術，尋找出擴張皮膚再生的關鍵蛋白，並對此蛋白的作用進行鑑定。收集未擴張的皮膚及擴張1周及2周的皮膚行差異蛋白組學檢測，發現Dsg3在不同時間點均高表達，遂行基因及蛋白水平驗證，均證實Dsg3的高表達。為驗證Dsg3的作用，構建攜帶siDsg3的質粒。體外實驗中，使用攜帶siDsg3的質粒轉染成纖維細胞，結果發現成纖維細胞的增殖能力及分泌I型膠原的能力明顯低於未加入質粒組。體外實驗則使用大鼠皮膚組織擴張模型，將攜帶siDsg3的質粒注射至皮下組織中，對照組為等量生理鹽水注射組。擴張過程中維持恆壓擴張，共注水8次。擴張結束後統計二組的擴張量，並收集不同時間點的大鼠擴張皮膚行組織學染色及wnt/β-catenin通路的檢測。結果發現，Dsg3的合成受到抑制後，皮膚再生的速度明顯減慢，表現為擴張結束時擴張量明顯低於對照組，膠原蛋白的含量、增殖細胞數量及毛細血管密度均低於對照組。組織免疫螢光染色及Western blot檢測發現siDsg3組β-catenin的表達也明顯降低，說明wnt/β-catenin通路在Dsg3促進擴張皮膚再生過程中發揮重要作用。通過以上的實驗結果說明Dsg3是擴張皮膚再生的關鍵蛋白，可以作為一個關鍵的調節靶點進行深入研究，以更大地發揮Dsg3的促擴張皮膚再生作用。
