《擬南芥BIPP1調節油菜素甾醇受體活性的遺傳和生化機制》是依託復旦大學，由蘇偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：擬南芥BIPP1調節油菜素甾醇受體活性的遺傳和生化機制
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：蘇偉
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
油菜素甾醇(BRs)是一類在調控植物生長發育和環境適應中發揮重要作用的植物激素。細胞表面的受體BRI1感受並轉導BR信號，雖然BRI1的磷酸化及其激活機製取得了重要進展， 但是其脫磷酸和脫敏機制還很不清楚。申請人以BRI1為誘餌，在我們建立的擬南芥磷酸酶的酵母文庫中篩選到一個新的磷酸酶BIPP1，並發現它能在短時間內使BRI1完全脫磷酸化。喪失BIPP1基因導致BR信號輸出放大。因此我們推測BIPP1可能在BRI1的脫磷酸化起關鍵作用，是BR信號轉導途徑負調節因子。本課題將深入研究BIPP1調控BRI1脫磷酸化及其活性的生化機制；遺傳分析BIPP1通過BRI1調控信號通路；研究BR信號對BIPP1的影響；以及鑑定新的BIPP1互作蛋白。該項目的完成不僅對於全面揭示BIPP1對BR信號轉導途徑的調控機制，而且對於其它受體激酶的研究具有重要的理論意義。
結題摘要
在油菜素甾醇信號轉導途徑的研究中，油菜素甾醇受體激酶BRI1的磷酸化及其激活機製取得了重要進展，但是其脫磷酸和脫敏機制還很不清楚。申請人通過篩選油菜素甾醇受體激酶BRI1相互作用蛋白,獲得了一個磷酸酶BIPP1，通過分子生物學和遺傳學方法研究了BIPP1與BRI1的相互關係，探討了BIPP1在油菜素甾醇信號通路中的功能。首先通過廣譜和特異的磷酸化抗體證實了BIPP 對於BRI1-JKC具有絲氨酸和蘇氨酸磷酸酶活性，但是不具有酪氨酸磷酸酶活性。通過bipp1突變體與油菜素甾醇相關突變體進行遺傳雜交分析，並檢測雙突變體中BR信號的改變，發現bipp1功能失活植株能夠恢復BR合成突變體det2-1的矮化表型,卻無法挽救BR受體突變體bri1-301的矮化表型,表明BIPP1確實是在BR信號傳導中發揮負調節因子的作用，這一結果也進一步被BIPP1過表達導致植株變小，反映油菜素甾醇信號變小所驗證。外源eBL能夠在轉錄和翻譯水平同時誘導BIPP1的表達，反映了BIPP1的表達受到油菜素甾醇信號通路的負反饋調控。此外，我們通過免疫共沉澱和質譜相結合的方法獲得了多個與BIPP1相互作用的蛋白，並對其中的HSP70蛋白進行了深入研究，結果表明通過BIPP1相互作用獲得的HSP70蛋白同樣展現影響油菜素甾醇信號輸出的特徵，並也會受到油菜素甾醇信號通路的負反饋調控。這些研究既增加了對油菜素甾醇信號負反饋調節的認識，又確定了BIPP1是一個新的通路負調控元件。同時，還為以後深入研究油菜素甾醇信號通路提供了很多可能的研究對象。這對於在植物中建立油菜素甾醇信號調節模型，以及探索磷酸酶研究相關技術具有非常重要的意義。
