基本介紹
- 中文名:接合中斷法
- 外文名:interrupted mating experhnent
- 利用:Hfr菌株與F-菌株間的接合中斷
- 測定:原核生物基因序列
- 繪製:環狀染色體圖
- 套用:早期埃希氏菌染色體上的基因定位
簡介,機理,
簡介
一種利用Hfr菌株與F-菌株間的接合中斷,測定原核生物基因序列並繪製環狀染色體圖的方法。
機理
由於接合過程中的DNA轉移過程有著穩定的速度和嚴格的順序性,所以,可在實驗室中每隔一定時間方便地用接合中斷器或組織搗碎機等措施,使接合中斷,獲得一批接受到Hfr菌株不同遺傳性狀的F-接合子。根據這一原理,再利用F質粒可正向或反向插入宿主核染色體組的不同部位(有插入序列處)的特點,構建幾株有不同整合位點的Hfr菌株,使其與F-菌株接合,並在不同時聞使接合中斷,最後根據F-中出現Hfr菌株中各種性狀的時間早晚(用min表示),就可畫出一張比較完整的環狀染色體圖。這就是由E.Wollman和F.Jacob(1955年)首創的接合中斷法繪製細菌環狀染色體圖基本原理(見圖)。
此法對早期大腸埃希氏菌染色體上的基因定位曾發揮了很大的作用。