《抗MERS-CoV高效廣譜中和抗體的篩選》是依託清華大學，由史宣玲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：抗MERS-CoV高效廣譜中和抗體的篩選
- 依託單位：清華大學
- 項目負責人：史宣玲
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
近兩年發現的新型冠狀病毒MERS-CoV可使超過半數的感染者出現類似SARS-CoV感染的嚴重呼吸道症狀，可人傳染人且具有較高的致死率，引起了全世界的高度關注。到目前為止，還沒有特效藥物和疫苗對該病進行治療和預防。MERS-CoV利用膜蛋白S進入易感細胞，其中S1存在受體結合域(RBD)，將RBD和該病毒的受體DPP4共結晶解析蛋白結構，發現RBD中有同受體結合的關鍵胺基酸位點。利用RBD進行動物免疫也檢測到其具有較強誘導中和抗體產生的能力。我們利用RBD篩選展示在酵母表面的人類非免疫scFvs文庫，得到兩株對MERS-CoV具有中和活性的人源單克隆抗體。本課題擬在此研究的基礎上，通過對抗體和RBD的結構和功能分析，篩選具有更加高效廣譜中和活性的單抗。該研究對於研發具有高效廣譜中和活性的單抗，進行MERS-CoV病毒感染的早期預防和治療具有重要的理論參考和實際套用價值。
結題摘要
本課題組在對中東呼吸道綜合徵冠狀病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus, MERS-CoV）的前期研究工作中，通過利用MERS-CoV的受體結合域（Receptor Binding Domain, RBD）篩選展示在酵母細胞表面的人類非免疫scFvs文庫，得到了兩株對MERS-CoV具有IC50納摩爾水平中和活性的人源單克隆抗體MERS-4和MERS-27。本課題在此研究工作的基礎上，通過對MERS-27和MERS-4的結構進行研究，不僅在原子水平揭示了MERS病毒的侵染機理，更為針對MERS-CoV表面S蛋白的疫苗研發和藥物研究提供了寶貴的結構信息。另外，我們利用蛋白構象正確的MERS-Spike三體蛋白，進行展示在酵母細胞表面的人類非免疫scFvs文庫篩選，獲得了一株新型的人源單克隆抗體；同時我們在MERS-4和MERS-27的基礎上，構建了單基因編碼的雙價特異性抗MERS-CoV抗體，結果顯示該方法完善了抗體的中和廣譜性，用一個新型抗體完成兩株抗體的中和病毒功能。以上研究工作均為新型抗MERS-CoV抗體藥物的研發提供了理論依據。我們也在利用免疫MERS-CoV spike蛋白的腺病毒疫苗免疫小鼠研究中，分析了小鼠B細胞中針對病毒膜蛋白的抗體，確認其中和活性確實是由血清中針對RBD的中和抗體在發揮作用，這部分研究工作為MERS-CoV新型疫苗的研製提供了理論和實驗依據。本課題緊緊圍繞抗MERS-CoV抗體開展的一系列研究工作，將為抗病毒的預防和治療提供新思路和方法，為最終控制該病毒的流行打下堅實的基礎。
