《抗HIV-1導向製劑小鼠模型的建立及其免疫治療機理研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由李昌擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：抗HIV-1導向製劑小鼠模型的建立及其免疫治療機理研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李昌
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
抗愛滋病病毒(HIV)導向製劑因具有高效、特異、無毒副作用等優勢，正成為愛滋病治療的全新領域，但限制其進一步發展的瓶頸是缺乏合適的評價模型和作用機制較難確證。為此，本研究擬在前期工作基礎上，基於HIV病毒粒子結構特點，套用反轉錄病毒載體系統，構建篩選穩定高效表達HIV-1中國流行株膜蛋白的細胞系SP2/0-gp120；利用異體同源腫瘤細胞系移植方法接種BALB/c小鼠，複製BALB/c小鼠荷SP2/0-gp120腫瘤模型；通過介入治療，綜合套用免疫學、病毒學和細胞生物學等技術和方法，開展導向製劑的體內外識別和結合、細胞殺傷、治療性免疫應答基本規律與分子機制等研究，以期建立理想的小鼠模型；探討該模型用於評價抗HIV導向製劑的可行性、有效性；初步闡明抗HIV導向製劑的作用方式、作用機制，為導向製劑的有效評價和進一步推向臨床奠定堅實基礎，也為抗HIV藥物或治療性疫苗的研製提供良好思路。
結題摘要
目前用於愛滋病疫苗或藥物評價相對較好的動物模型主要是通過非人靈長類動物如黑猩猩、長臂猿、恆河猴等感染猴免疫缺陷病毒（SIV）或人/猴嵌合病毒（SHIV）構建。但這些動物資源稀缺，維持與飼養費用很高，模型建立需要在生物安全三級以上高等級實驗室操作，而且這些動物具有一定的危險性，實際工作中使用極不方便，一般僅用於最後階段的測試，而對於侯選疫苗或藥物的初期大量篩選而言，成本太高，操作困難。因此，尋找和建立廉價、簡單、適用的AIDS動物模型用於疫苗、藥物評價和發病機制研究一直是愛滋病科研團隊努力的重要方向。鑒於此，我們在國家自然科學基金的資助下，利用病毒載體系統，開展了小鼠荷瘤模型的構建與鑑定研究，以期為愛滋病疫苗或藥物評價提供簡便有效的動物模型。 通過本項研究，取得的主要研究結果為： （1）建立了反轉錄病毒載體系統技術平台。通過嘗試利用不同的反轉錄病毒穿梭載體作骨架、利用不同的包裝系統進行反轉錄病毒的包裝，建立了反轉錄病毒載體系統技術平台，包裝獲得了含有HIV-1 gp120的反轉錄病毒，為細胞模型構建提供了前提。 （2）構建了表達HIV-1外膜蛋白gp120的腫瘤細胞系。利用製備的反轉錄病毒感染不同的小鼠腫瘤細胞系，通過對外源基因的整合、轉錄及表達進行鑑定，成功篩選到可穩定表達HIV-1 gp120的小鼠結腸癌細胞系CT26/gp120，為小鼠模型的構建奠定了基礎。 （3）建立了小鼠荷瘤模型。在獲得細胞系和進行預實驗的基礎上，進行了小鼠荷瘤試驗。結果表明，無論是CT26對照細胞系，還是表達HIV-1外膜蛋白基因gp120的CT26/gp120細胞系，都能夠成瘤，前者成瘤率高，為96.9%，而後者腫瘤生長緩慢，成瘤率雖沒前者高，但也能夠達到77.5%，可以滿足後期實驗需要。 （4）開展了荷瘤模型的體內免疫治療效果評價研究。為評價荷瘤模型的有效性，構建並製備了含有HIV-1多表位基因的候選愛滋病病毒載體疫苗，開展了小鼠荷瘤模型的免疫治療效果評價研究。T淋巴細胞計數及特異性CTL結果表明，該模型可用於疫苗的初步評價。
