《抑制LRRK2激酶活性保護帕金森氏病的實驗研究》是依託蘇州大學，由劉朝暉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：抑制LRRK2激酶活性保護帕金森氏病的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉朝暉
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
對帕金森氏病(PD) 我們還缺乏足夠地了解因而目前還缺乏有效的治療手段。家族遺傳性PD的發病機制研究為我們尋找治療的靶點提供了強有力的幫助。LRRK2是一個發病率最高的遺傳性PD相關突變並且與散發性PD有最密切的關係，研究表明其激酶活性增高是導致神經毒性最重要的原因。抑制激酶活性的化合物是很有希望的治療PD的方法，然而其在體理論依據不足。基於我們前期研究的工作基礎和新的基因工程技術的發展，我們計畫使用果蠅生物模型研究在體進行LRRK2編碼基因修飾，升高以及抑制其激酶活性後觀察對其神經毒性的影響。另外，綜合不同生物研究模式的優勢，我們使用轉基因細胞、果蠅和小鼠進行中草藥LRRK2激酶活性抑制劑的篩選，為中藥現代化開發建立更多高水平的研究平台。
結題摘要
帕金森病是一個非常普遍的神經系統退行性疾病，隨著人口的老齡化發展，其發病率不斷增高，對其發病機制的探討和相關治療方面的研究具有重大的社會意義和經濟價值。在本項目的研究中，我們利用定點插入技術研究LRRK2激酶活性增高的突變對PD發病的影響，我們成功製備了LRRK2突變轉基因果蠅並確定激酶活性的增高是引起神經毒性的最重要因素。我們在轉基因果蠅通過定點突變抑制LRRK2增高的激酶活性，觀察其對神經毒性的抑制作用，觀察到定點突變顯著降低了LRRK2/G2019S轉基因果蠅增高的激酶活性，但對於轉基因果蠅行為學改變的影響不顯著。針對LRRK2激酶活性增高是PD相關突變引起神經毒性的重要因素，從植物單體和化合物中找到能有效抑制LRRK2激酶活性的藥物並進行臨床開發是我們將研究推向市場開發的一個必須的步驟。我們通過體外細胞篩選系統進行初篩，然後選擇轉基因果蠅進行觀察並最終使用轉基因小鼠完成實驗室鑑定。我們篩選出有效抑制LRRK2激酶活性的中草藥單體阿魏酸乙酯，芹菜苷，大豆異黃酮, 大黃素,白藜蘆醇, 槲皮素，表沒食子兒茶素沒食子酸酯，CDDO。進行這些單體化合物的轉基因果蠅實驗，發現它們可以通過抑制LRRK2的激酶活性，進一步通過影響不同的信號通路來發揮良好的生物學效應。我們還和藥物開發公司分工合作，由藥物開發公司對具有激酶抑制活性的先導化合物進行結構改造，在體外檢測獲得具有生物活性和良好的血腦屏障通透的化合物，從中篩選出了目標化合物進行轉基因果蠅實驗，最終篩選出兩個具有良好生物活性的化合物進行了PD小鼠模型的檢測，研究的結果對尋找PD有效的治療藥物具有重要的價值。
