心肌纖維化相關microRNA的上游調控機理研究

《心肌纖維化相關microRNA的上游調控機理研究》是依託西安交通大學，由蔣小英擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：心肌纖維化相關microRNA的上游調控機理研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：蔣小英
• 依託單位：西安交通大學

中文摘要

miRNA轉錄後加工現象非常廣泛而研究不足，僅有幾個蛋白分子被識別調控這一過程。miR-21等miRNA參與心肌纖維化已被證實，現有研究表明這幾個蛋白極有可能在心肌成纖維細胞（CFs）調控miR-21的加工成熟，然而國際上尚未見任何報導。我們長期研究心肌纖維化，掌握了研究miRNA加工成熟的思路和方法，欲研究miR-21等心肌纖維化miRNA在CFs中的上游調控機理：揭示血管緊張素Ⅱ對候選miRNAs的調控是轉錄方式還是轉錄後方式以及兩種受體的區別；用RIP技術研究SMAD，P53等蛋白在CFs調控miR-21等miRNAs加工成熟的機制；用RNA Pull-Down技術探求CFs中調控miRNAs加工成熟的新的調控分子。完成該課題可以完善心肌纖維化的病理機制，為開發新的治療靶點奠定實驗基礎，並為涉及多種疾病的miRNA加工機制提供新的實驗依據。該課題具有廣闊的基礎研究價值和臨床套用前景。

結題摘要

本項目自2012年開始至2014年年底歷時3年，以血管緊張素II (angiotensin II, Ang II) 刺激的心肌成纖維細胞(cardiac fibroblasts, CFs)為體外模型，在細胞水平上研究非編碼RNAs (noncoding RNAs, ncRNAs)在心肌纖維化中的作用，先後識別了Ang II在CFs中誘導的微小RNAs (microRNAs, miRNAs)和長鏈非編碼RNAs（long noncoding RNAs, lncRNAs），並進一步研究了它們的作用模式。我們早期研究發現miR-21雖然在CFs高表達，但AngII處理並未引起miR-21表達上調。進一步研究表明AngII誘導CFs後33個miRNAs表達差異，real time-PCR證實了rno-miR-132, -125b-3p, -146b, -300-5p, -204*和miR-181b的表達改變並預測了他們的靶基因。我們進而檢測了幾個miRNA（miR-125b-3p，miR-300-5p和miR-132）的成熟體和前體Primary（rPri-300-5p, rPri-125b-3p和rPri-132）的表達水平，發現miR-132在CFs存在轉錄後加工現象，我們正在研究TRBP和P53這兩個蛋白調控miR-132轉錄後加工機制的確切機理。我們同時識別了AngII誘導CFs後差異表達的lncRNAs，發現AngII動態下調 lncRNA-NR024118和 lncRNA-NR027324的表達，而且這一調控是AT1受體依賴性的。目前該課題已發表SCI收錄文章4篇，Medline收錄文章一篇。