基本介紹
- 中文名:影印平板法
- 時間:1952年
- 人物:J. Lederberg夫婦
- 實踐:分離出各種類型的突變菌種
歷史,理論(實驗步驟),實踐,
歷史
1952年,J. Lederberg夫婦的論文《平板影印培養法和細菌突變株的間接選擇》,更好地證明了微生物的抗藥性是在未接觸藥物前自發地產生的,這一突變與相應藥物環境毫不相干。
理論(實驗步驟)
把長有許多菌落的母種培養皿倒置於包有滅菌絲絨布的木質圓柱印章上,使其沾上來自平板上的菌落。然後可把這一“印章”上的菌落一一接種到不同的選擇性培養基平板上。待這些平板培養後,對各平板相同位置上的菌落作對比後,就可選出適當的突變型菌株。據報導,用此法可把母平板上10%-20%量的細菌轉移到絲絨布上,並可利用這一“印章”接種8個子培養皿。
具體實驗過程是:將待測的濃縮菌懸液塗在合適的平板上,等其長好後作為母平板(每平板上的菌落控制在50~300個);用一小塊滅菌的絲絨固定在直徑較平板略小的圓柱形木塊上,構成印章(即接種工具);然後把長有菌落的母平板倒置在絲絨的印章上,輕輕印一下;再把此印章在另一含有選擇培養基的平板上輕輕印一下,經培養後,選擇培養基平板上長出的菌落與母平板上的菌落位置對應,比較影印平板與母平板上菌落生長情況,即可從相應位置的母平板上選出待測的突變型菌落。影印法最初是為證明微生物的抗藥性突變是自發的、與相應的環境因素無關而設計的實驗,已廣泛套用於營養缺陷型的篩選以及抗藥性菌株篩選等研究工作中。
實踐
通過影印培養法,就可以從在非選擇性條件下生長的細菌群體中,分離出各種類型的突變菌種。