《幹細胞樣抗原致敏後效應T細胞過繼免疫治療惡性膠質瘤》是依託復旦大學，由花瑋擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：幹細胞樣抗原致敏後效應T細胞過繼免疫治療惡性膠質瘤
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：花瑋
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
惡性膠質瘤死亡率高，療效差，過繼免疫治療已被證實是針對惡性腫瘤的有效治療方法之一。我們前期工作研究發現膠質瘤幹細胞樣抗原（從CD133或A2B5陽性細胞獲取）具有強免疫原性，其製備的樹突狀細胞疫苗經體內外試驗證實安全有效。本研究擬分選出A2B5+膠質瘤細胞，套用A2B5+幹細胞樣抗原致敏樹突狀細胞，並進一步介導T細胞增殖，再優選出CD3+CD4+FOXP3-效應T細胞減少負性免疫調節，對惡性膠質瘤開展效應T細胞過繼免疫治療。利用小鼠膠質瘤免疫治療模型檢驗該方法的安全性及療效，同時用GFP標記T細胞進行體內示蹤；檢測腫瘤浸潤淋巴細胞中調節性T細胞的變化；另比較A2B5陽性和A2B5陰性細胞的蛋白表達差異，探索膠質瘤免疫治療以及免疫逃逸可能的機制。本研究期望為惡性膠質瘤過繼免疫治療提供動物試驗依據，為臨床套用打好基礎。
結題摘要
膠質瘤是中樞神經系統中最常見的腫瘤，過繼免疫治療已成為繼手術，放、化療後的第四種治療方法。通過本研究我們分別從體外試驗、動物試驗證實了膠質瘤幹細胞樣抗原（從 CD133 或 A2B5陽性細胞中獲取）具有強免疫原性，並進一步完成了I/II期臨床轉化；同時我們還分析來腫瘤幹細胞相關特性及分子學機制，並分析了荷瘤小鼠的免疫系統變化。我們首先在體外用Vitamin C 提高膠質瘤A2B5+細胞比率，再通過流式細術分選出 A2B5+膠質瘤細胞，套用 A2B5+幹細胞樣抗原致敏樹突狀細胞，並誘導產生膠質瘤特異性T細胞，用於治療小鼠惡性膠質瘤模型且取得了初步的療效。結果發現早期介入DC疫苗治療能有效延長荷瘤小鼠生存期，DC疫苗與T細胞聯合治療同樣更加有效，我們觀測到了腫瘤中CD3+細胞浸潤，外周血中CD4/CD8比例下降。我們檢測了荷瘤小鼠不同時段的多種細胞因子如IFN、IL-4、IL-10、IL-17等以及小鼠外周血、脾、淋巴結中淋巴細胞分類及表型的變化研究中，結果發現荷瘤小鼠早期機體免疫系統改變不大，晚期呈現免疫抑制，主要表現為調節性 T 細胞增加。在膠質瘤幹細胞樣抗原基礎上建立的樹突狀細胞疫苗經體外、動物試驗證實有效後，我們進行了I期臨床試驗，證實了其安全性可行性，現在進行II期臨床試驗驗證其有效性。同時我們比較了 A2B5 陽性/陰性細胞的分子學特徵，發現MHC I類分子、TRP2、gp100等在A2B5 陽性細胞高表達，B7H3同樣高表達於A2B5 陽性細胞，同時我們意外地發現了B7H3免疫之外的功能。此外myc在A2B5 陽性高表達，myc在腫瘤幹細胞致瘤性中起到重要作用，並受組蛋白H3K4me3/H3K27me3比例的表觀遺傳學調控。此外我們還針對T細胞示蹤問題，利用超順磁性氧化鐵（SPIO）來標記 T 細胞，通過MR檢測，為將來免疫治療的體內示蹤奠定基礎。該研究從體外試驗、動物實驗、I期臨床試驗、分子機制等各方面闡明了幹細胞樣抗原的作用，為膠質瘤免疫治療提供了新思路。
