小鼠精原幹細胞體外誘導分化為胰腺細胞的初步研究

小鼠精原幹細胞體外誘導分化為胰腺細胞的初步研究

《小鼠精原幹細胞體外誘導分化為胰腺細胞的初步研究》是依託西安交通大學,由寧亮擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

  • 中文名:小鼠精原幹細胞體外誘導分化為胰腺細胞的初步研究
  • 項目類別:青年科學基金項目
  • 項目負責人:寧亮
  • 依託單位:西安交通大學
中文摘要,結題摘要,

中文摘要

糖尿病的幹細胞治療是近年來臨床研究的熱點之一,但由於胚胎幹細胞及多種成體幹細胞存在免疫排斥,腫瘤形成及倫理問題,限制了這一技術的進一步研究和臨床套用。本課題在國內外相關研究和前期預實驗的基礎上,首次提出小鼠精原幹細胞可能具有向胰腺細胞分化的潛能。在本研究中,我們將純化的GFP+CD49f+H-2Kb- 精原幹細胞在體外誘導分化為胚胎幹細胞樣細胞,並加入胰腺分化相關的誘導因子(Activin A,b-FGF及Extendin-4)進行體外誘導,然後將誘導後的細胞分別移植入體外培養的胚胎小鼠胰腺及裸鼠的胰腺中,分別觀察不同時間段供體來源GFP陽性細胞在受體胰腺中的表達胰腺細胞標誌物的水平以及受體小鼠血液中胰島素水平,以評估精原幹細胞向胰島細胞分化的可能性及效率。這一研究的成功開展,將為糖尿病的幹細胞治療提供新的來源細胞,為這一技術的臨床套用開闢新的研究方向。

結題摘要

精原幹細胞(spermatogonial stem cell) 是存在於睪丸生精小管,不斷增殖和分化以產生精子的男性生殖幹細胞。青春期前的血液系統腫瘤患兒可由於大劑量放化療等原因造成精原幹細胞的丟失,從而導致成年後不育症的發生。動物實驗結果顯示,體外培養新生小鼠精原幹細胞可以獲得成熟精子並通過體外受精-胚胎移植產生健康的後代。本項目在前期小鼠實驗和體外實驗結果的基礎上,使用細胞生物學和分子生物學研究方法,試圖研究建立一套高效安全的人類精原幹細胞分離,凍存和體外成熟體系,以期獲得可用於體外受精的成熟精子(或圓形精子細胞),加以凍存以用於患者成年後可能進行的體外受精-胚胎移植,從而保留患兒的生育能力。本項目的研究將旨在建立一種新的人類精原幹細胞分離,培養及體外成熟的系統,並將對其有效性和安全性進行初步評估,以期最終為放化療導致的不育症患者提供一種安全有效的生育保存和恢復手段。在本項目的前期研究中,本研究小組已經建立了小鼠(野生/轉基因)精原幹細胞原代培養模型,初步建立了人類精原幹細胞分離,純化,鑑定及原代培養的技術方法;同時在研究中發現小鼠骨髓間充質幹細胞具有向小鼠睪丸間質細胞(Sertoli細胞及Ledig細胞分化的潛能),這一特性可以為精原幹細胞移植後的幹細胞歸巢問題提供新的理論基礎。

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