寄生蟲感染的分子生物學檢測

寄生蟲感染的分子生物學檢測是指對寄生蟲的基因和核酸進行診斷的技術，具有高度的敏感性和特異性，用於各種寄生蟲病的檢測和診斷。每一種寄生蟲都有其特定的核酸序列（基因片段），檢測其特有的核酸序列與檢測蟲體具有同樣的診斷價值，可以作為確診依據。

基本介紹

• 中文名：寄生蟲感染的分子生物學檢測
• 臨床意義：為寄生蟲病診斷提供了有益的補充

操作方法

1. 聚合酶鏈式反應技術

聚合酶鏈式反應（PCR）是一種體外酶促合成、擴增特定DNA片段的技術。被檢病原體核酸序列在PCR體系下經高溫變性、低溫退火和適溫延伸三步循環，將單個核酸分子序列進行大量複製、擴增。為縮短PCR模板製備時間，只需要極少量的部分純化和濃縮的樣品就可進行過濾，模板製備快速有效，只需3～10個原蟲就可直接套用過濾方法進行PCR檢測。

2. 實時螢光定量聚合酶鏈式反應技術

實時螢光定量PCR通過將螢光探針或螢光色素結合至PCR反應混合物，而無需隨後的凝膠電泳，在一台儀器內同時擴增靶序列和分析產物，利用螢光信號累積實時監測整個PCR進程，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析。

3. 經化學試劑特殊處理的棉纖維卡片技術

在過濾基質中包埋蛋白質變性劑、螯合劑和自由基捕捉劑，再收集樣品並提取、純化核酸，進行後續的PCR擴增分析。

4. 環介導等溫擴增技術

環介導等溫擴增技術（LAMP）是一種新穎的恆溫核酸擴增方法，在60℃～65℃條件下，短時間內進行核酸擴增，不需要模板的熱變性、溫度循環、電泳及紫外觀察等過程，不依賴任何專門的儀器設備，實現高通量快速檢測。

5. 基因晶片技術

採用光導原位合成或顯微印刷等方法將大量特定序列的探針分子密集、有序地固定於經過相應處理的矽片、玻片、硝酸纖維素膜等載體上，然後加入標記的待測樣品，進行多元雜交，通過雜交信號的強弱及分布，來分析目的分子的有無、數量及序列，從而獲得受檢樣品的遺傳信息。

6. DNA探針技術

又稱分子雜交技術，首先處理樣本以獲取寄生蟲DNA，將DNA固定於載體上，最佳化探針的雜交條件和檢測程式等，然後測定探針的特異性，用臨床標本評價方法檢測不同標本。

臨床意義

寄生蟲感染分子生物學檢查具有規模化、自動化特點，可以對多個樣本進行同時檢測，尤其適用於大樣本的檢測，較傳統的病原學技術用時短，為寄生蟲病的實驗診斷技術提供了有益的補充。