《家豬干擾素誘導表達信號通道RIG-I與病毒PRRSV 抑制的研究》是依託四川大學，由曾凡亞擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：家豬干擾素誘導表達信號通道RIG-I與病毒PRRSV 抑制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：曾凡亞
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
近年來，對病毒RNA誘導宿主先天免疫應答研究發現，RIG-I信號通道是細胞識別病毒RNA、激活干擾素表達的重要路徑，也是多種病毒調控宿主先天免疫應答的作用對象。本項目擬對豬繁殖與呼吸綜合徵病毒（PRRSV）抑制宿主RIG-I信號通道的問題進行研究。首先，對家豬RIG-I信號通道分子克隆和測序，研究它們在西方品系和藏豬中的遺傳多樣性。再將PRRSV蛋白分別表達，在敏感品系中鑑定出抑制RIG-I通道的病毒蛋白，測試對其它品系的抑制差異。通過比較RIG-I通道遺傳多樣性品系受病毒蛋白抑制的差異、表達或敲除通道分子、檢測通道分子受抑制的效應等，發現和確定受病毒蛋白抑制的RIG-I通道分子。最後，用免受抑制的通道蛋白（來自不同品系或物種或經基因改造）和其它信號通道分子，重建抑制解除的RIG-I信號通道。以上研究將為闡明PRRSV抑制RIG-I信號通道機制、發現和創造動物抗病毒基因資源提供理論支持。
結題摘要
在本項目獲準的一年研究時間內，課題組圍繞家豬先天免疫信號通道蛋白的遺傳多樣性和表達水平對宿主PRRSV易感性的影響展開研究。主要進行了：1、藏豬先天免疫信號通道RIG-1蛋白分子的基因克隆、測序，與其它品系同類分子的序列比較分析；2、藏豬、約克豬肺泡巨噬細胞體外病毒感染試驗，約克豬、榮昌豬PRRSV攻毒試驗；3、藏豬和約克豬肺泡巨噬細胞數字基因表達譜（DGEs）建立及先天免疫相關基因表達分析。研究結果顯示，藏豬先天免疫信號通道RIG-1主要分子的核酸和胺基酸序列都與西方品系存在明顯差異，它們可作為分子標記區分PRRSV易感性差異個體，鑑定藏豬雜交後代分離群體中不同易感性個體的基因型，篩選病毒抗性或耐受性基因。肺泡巨噬細胞體外攻毒和活體攻毒試驗顯示，藏豬、約克、榮昌豬對PRRSV的易感性存在差異，如肺泡巨噬細胞攻毒的感染率和活體攻毒後宿主反應（病症、體溫變化、失去體重、病毒繁殖等）。藏豬肺泡巨噬細胞數字基因表達譜分析顯示，參與藏豬與約克生物學過程的多個基因都存在表達差異，包括先天免疫激活信號通道的受體和主要信號傳遞蛋白。
