《家蠶絲蛋白的結構解析和性能最佳化》是依託中國科學技術大學，由李衛芳擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：家蠶絲蛋白的結構解析和性能最佳化
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李衛芳
- 依託單位：中國科學技術大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
絲蛋白的分泌、裝配和成絲機理一直國內外學者研究的熱點。本課題以家蠶(Bombyx mori)蠶絲為研究對象，以絲心蛋白為重點，絲膠蛋白為輔助，在蛋白質結構和生理功能水平上同時對組成蠶絲的各種蛋白質進行研究。利用天然蛋白純化、重組蛋白超量表達、蛋白質變復性等實驗技術獲得均一穩定的絲蛋白各個組分，並採用X射線晶體學手段解析其三維結構。同時，對重組絲蛋白進行理化性質的測定和體外成絲實驗，以研究蠶絲各組分的作用和相互關係。基於一些關鍵蛋白質或蛋白質複合物的三維結構和相互作用研究，初步闡明蠶絲在原子解析度水平上的摺疊和包裝機理。在此基礎上，通過體外突變對蠶絲的性能進行定向改造，並為相關的轉基因家蠶品系的構建提供理論指導。
結題摘要
絲蛋白的分泌、裝配和成絲機理一直是國內外學者研究的熱點。本課題以家蠶(Bombyx mori)蠶絲為研究對象，以絲心蛋白為重點, 在蛋白質結構和生理功能水平上對組成蠶絲的各種蛋白質進行了細緻的研究。利用天然蛋白純化、重組蛋白超量表達、蛋白質變復性等實驗技術獲得了均一穩定的絲蛋白輕鏈-重鏈FibL-FibHc(26-54)複合體，得到了衍射解析度為4 埃的晶體，晶體還有待進一步最佳化。保幼激素JH與家蠶的發育和吐絲都有密切的關係，我們克隆了JH降解關鍵酶JHEH、JHE；JH合成關鍵酶JHAMT；JH候選受體MET，已經解析了JHEH的結構（2.30埃）。FMBP-1，作為絲心蛋白的調節因子，與家蠶重鏈的時空特異性高度一致，在Fib-H的表達過程中起著非常關鍵的作用。我們解析了BmSTPR與13-bp, 18-bp和20-bp DNA的複合物結構，衍射解析度分別為1.95埃、2.20埃和2.40埃。這些工作為我們進一步研究家蠶絲蛋白表達分泌的高效性提供了理論依據。
