《家族性腎性糖尿致病基因SLC5A2新突變C361G的功能研究》是依託上海交通大學，由孫驊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：家族性腎性糖尿致病基因SLC5A2新突變C361G的功能研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：孫驊
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
2型糖尿病靶向治療新藥SGLT2抑制劑通過抑制腎葡萄糖重吸收、增加尿糖排泄達到控制血糖的目的，其作用機制與SLC5A2基因突變引起的家族性腎性糖尿發病機制相似。本研究基於SLC5A2天然突變可能成為SGLT2抑制劑開發潛在靶點的構想，對一個家族性腎性糖尿致病新突變C361G進行功能分析。通過建立穩定表達C361G的CHO細胞體外模型，(1)對突變蛋白的表達分布和代謝進行觀察，(2)通過檢測同位素標記葡萄糖底物轉運及轉運過程中發生的膜電位變化等電生理現象深入闡明C361G對SGLT2結構功能的影響及其致病機制，(3)比較各類已知SGLT2抑制劑對C361G突變蛋白的抑制動力學參數，(4)完善C361G突變結構的生物信息學分析、利用分子對接篩選新的SGLT2抑制劑先導化合物，闡明該位點成為潛在新藥開發靶點的價值。本研究將為新型高效低副作用SGLT2抑制劑的開發提供思路和潛在的靶點。
結題摘要
2型糖尿病靶向治療新藥SGLT2 抑制劑通過抑制腎葡萄糖重吸收、增加尿糖排泄達到控制血糖的目的，其作用機制與SLC5A2 基因突變引起的家族性腎性糖尿發病機制相似。本研究基於SLC5A2 天然突變可能成為SGLT2 抑制劑開發潛在靶點的構想，對一個家族性腎性糖尿致病新突變C361G 進行功能分析。通過建立穩定表達C361G 的CHO 細胞體外模型，採用脈衝跟蹤試驗方法，通過免疫共沉澱和同位素標記研究此C361G突變蛋白的分布和代謝，顯示C361G位點突變體並未隨著時間的推移引起蛋白質合成的增加，反而逐漸降低，說明該位點突變導致SGLT2蛋白質的不穩定性，易在細胞內降解。套用螢光共振能量轉移技術測量細胞去極化前後460nm和580nm的螢光變化，突變型C361G介導糖轉位引起的膜電位變化明顯小於野生型，說明C361G突變蛋白SGLT2對葡萄糖轉運活性明顯降低，導致腎小管上皮細胞不能通過異常的SGLT2分子對原尿中的葡萄糖有效重吸收。本項目闡明了SLC5A2 突變C361G 導致腎性糖尿的致病機制，SLC5A2為開發新的糖尿病靶向治療用藥提供分子模擬位點。
