《多肽/蛋白質的原子光譜/元素質譜絕對定量分析方法學》是依託廈門大學，由王秋泉擔任項目負責人的重點項目。
基本介紹
- 中文名：多肽/蛋白質的原子光譜/元素質譜絕對定量分析方法學
- 項目類別：重點項目
- 項目負責人：王秋泉
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
多肽/蛋白質的絕對定量是蛋白質科學研究中的難題之一。本項目研究多肽/蛋白質的元素/同位素標記策略，進而發展基於原子光譜/元素質譜的多肽/蛋白質絕對定量分析方法學。以鑭系元素、汞和硼以及其同位素為標籤，發展多肽/蛋白質的單、雙和多元素/同位素標記策略，實現它們的光誘導還原-原子螢光光譜和同位素稀釋-電感耦合電漿質譜高靈敏絕對定量分析。強化免疫富集分離策略，從製備新型高效色譜固定相和構建色譜-微液滴-電泳多維分離體系入手，提高多肽/蛋白質的分離效率，實現多種關鍵多肽（巰基多肽）和蛋白質疾病標誌物（P450、PSA和EDN等）的絕對定量分析。研究成果不僅對認識在不同有毒物質侵擾下和不同病理狀態下多肽/蛋白質的表達水平、疾病的早期診斷以及康復狀況的跟蹤具有重要意義，而且將挖掘原子光譜/元素質譜在蛋白質科學研究中的套用潛力，解決目前生物質譜難以解決的多肽/蛋白質的絕對定量難題。
結題摘要
本項目經過四年的研究，已建立起較為完備的多肽/蛋白質元素標籤的合成方法，發展了單、雙、多重標記策略和高分辨單維/多維分離系統，實現了基於AFS/ICP-MS多肽/蛋白質的絕對定量以及色譜-質譜-光譜多維信息的獲取，並進一步發展了面向腫瘤細胞和病毒的生物特異性反應捕獲標記策略與計數的新方法。主要成果：1、發展了基於內源元素標籤和外源元素化學選擇性標記策略的AFS/ICP-MS多肽/蛋白質絕對定量分析方法；2、建立了面向複雜多肽/蛋白混合物的高分辨單維/多維微尺度液相分離平台；3、發展了基於生物特異性反應標記策略的ICP-MS多肽/蛋白質絕對定量分析方法；4，發展了基於生物特異性反應的非標記ICP-MS蛋白質絕對定量分析方法；5、設計製備了正交集成軟-硬電離源質譜的“Chemical Hub”(化學樞紐)，同步獲得定性定量信息；6、建立了基於生物特異性反應捕獲標記策略的ICP-MS細胞/病毒計數方法；7、初步建議了前列腺癌早期診斷標誌物“前列腺特異性膜抗原”的閾值。項目執行期間發表SCI論文32篇，包括Angew. Chem. Int. Ed. 2篇、Environ. Sci. Technol. 1篇、Anal. Chem. 4篇、Chem. Comm. 1篇、Chem. Eur. J. 1篇；申請發明專利7項，已授權1項；受邀在國際學術會議上做plenary lecture 1，keynote 3，invited 9次；培養在站博士後1名、已畢業博士6名、碩士16名。
