《基於高效微管電泳的體內藥物手性分析新技術研究》是依託天津大學，由丁國生擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：基於高效微管電泳的體內藥物手性分析新技術研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：丁國生
- 依託單位：天津大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
目前，手性藥物分析已成為毛細管電泳/電色譜技術的一個重要套用領域。雖然毛細管電泳/電色譜具有高效、經濟等特點，但高的濃度檢測限和難以進行半製備性分離的缺點，嚴重製約了該技術在體內手性藥物分析方面的套用。本項目以獲得專利的高效微管電泳技術為支撐，以單分散功能化納米微球為電泳添加劑，通過合理的接口設計和實驗方案最佳化，構建集樣品預處理、半製備性手性分離、高靈敏檢測和樣品組分收集等操作為一體的手性藥物分析新技術平台；以布洛芬和普萘洛爾等手性藥物為對象，通過與常規毛細管電泳/電色譜技術在分離效率、操作靈活性、靈敏度及套用範圍等方面的系統比較，從方法學角度闡明所建立技術在體內手性藥物分析中的優缺點；在上述研究的基礎上，將新技術用於體內手性藥物及其代謝物的靈敏、高效和快速分離分析。
結題摘要
採用種子生長法製備了氨基修飾、雙氨基修飾、氨基和C8鏈同時修飾以及羧基修飾的矽膠基質納米微球。通過紅外、元素分析、掃描（透射）電鏡、粒度及Zeta 電位分析等手段對所製備納米材料進行了表征，結果表明所製備納米微球具有球型規整、粒徑分布窄和水溶液中分散性好等優點。將所製備納米微球用於電泳實驗，實現了有機酸、植物激素和食品色素等不同種類化合物的高效、快速分離；結合一些探索性實驗對電泳過程分離的機理進行了探討。以羧甲基-β環糊精、羥丙基-β環糊精為手性選擇試劑，以普萘洛爾、氯苯那敏和麻黃鹼等手性藥物為分離對象，通過在電泳運行緩衝液中加入納米微球，考察了納米微球種類和濃度對手性分離的影響。研究發現，氨基功能基團修飾的納米微球由於能與羧甲基-β環糊精產生較強的靜電作用，從而使得作為手性選擇試劑的羧甲基-β環糊精在納米微球表面得到局部富集；此外，氨基功能基團修飾的納米微球可以通過靜電作用吸附於分離通道內壁形成一動態塗層。進一步研究發現這一塗層不僅可以改變整個電泳體系的電滲流，也直接參與了手性分離過程。功能化納米微球的引入，不僅可以大幅度提高手性拆分的效果，也大大降低了手性選擇試劑的用量。以L-色氨酸為模板分子，以氨基修飾納米矽球為核心，成功製備了表面分子烙印手性納米微球（粒徑87nm， 烙印層厚度7nm）。以此納米微球為準固定相，在10分鐘內快速分離了色氨酸的外消旋體，分離度高達2.73。 這種以納米矽球為核心的表面分子印跡微球製備策略，有效克服了傳統有機基質分子印跡微球在有機溶劑中易溶脹、傳質性能差以及容易對紫外檢測產生嚴重干擾等缺陷。將此納米微球用於高效微管電泳的手性分離實驗正在進行中。以檸檬酸為還原劑，製備了粒徑13nm的金納米粒子，通過與牛血清蛋白（BSA） 結合形成了具有手性識別能力的複合納米粒子。通過靜電作用將其固定在毛細管內壁，在開管電色譜模式下拆分了麻黃鹼等外消旋體。以國產大環抗生素-鹽酸去甲萬古黴素（NVC）為還原劑還原氯金酸，在不添加任何外加試劑條件下一步合成了NVC修飾的金納米粒子（NVC-GNPs）。在金納米粒子形成過程中，NVC既作為還原試劑，又起到了穩定劑的作用；通過控制反應過程中NVC的用量和反應溫度，可對GNPs的粒徑進行有效的控制。以NVC-GNPs為緩衝添加劑進行直接手性分離的電泳實驗目前正在進行中。
