《基於臨床定量激酶組學研究發現肝癌早期診斷標誌物》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由王紅霞擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：基於臨床定量激酶組學研究發現肝癌早期診斷標誌物
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王紅霞
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝癌早期診斷是其有效治療與長期生存的關鍵，從疾病發生髮展機制層面，溯源式探尋高靈敏、高特異且具有臨床通用價值的早期診斷標誌物是其解決之道。蛋白激酶功能失調是導致癌症產生的關鍵因素，其介導的多個信號通路與肝癌發生髮展密切相關，涉及細胞增生、血管生成、侵襲和生存。蛋白激酶抑制劑也已成為目前肝癌分子靶向治療一線用藥。為此，本項目擬從定量激酶組視角切入，關注肝癌形成進程中激酶組及磷酸化激酶組動態變化，採用多種小分子抑制劑富集激酶結合質譜分析的化學蛋白質組技術，對臨床標本（含正常肝、肝硬化、早期肝癌及癌旁組織）激酶組及磷酸化激酶組進行非定向、全景式定量表征，遴選肝癌早期診斷候選標誌物；進一步運用免疫組化方法開展大樣本臨床確證及動物水平的標誌物生物學功能實驗，以期為臨床提供靈敏度高、特異性強且生物學功能與機制明確的肝癌早期診斷新分子標誌物，亦可為激酶靶向抑制劑的研製提供研究基礎。
結題摘要
肝癌是世界範圍內常見惡性腫瘤，在我國居癌症死因第二位，生存期短、死亡率高是其典型特徵。原發性肝癌起病隱襲，早期病症不明顯導致診斷難度大，確診時大部分患者已癌症晚期或局部轉移。對於晚期肝癌，目前唯一的靶向藥物為多激酶抑制劑索拉菲尼，且僅對20~30%病人有效。因此，高靈敏早期診斷標誌物和靶向藥物新靶點的發現是肝癌研究領域亟待解決的難題。蛋白激酶功能失調是導致癌症產生的關鍵因素。激酶介導的多個信號通路與肝癌的發生髮展密切相關。對整個信號通路網路的激酶組變化研究有助於揭示肝癌的複雜發病機制，尋找靈敏、特異性高的肝癌早期診斷標誌物以及新的治療靶點。 本項目建立了小分子抑制劑富集激酶結合非標記定量蛋白質組技術的激酶組研究新方法，能夠對激酶組進行非定向、全景式定量表征，大大提高了定量激酶組研究的準確性和可靠性。套用該方法對來自臨床的肝癌及癌旁組織進行了激酶組學比較研究，共找到93種差異顯著的激酶，其中80個激酶在肝癌組織中表達量上調，13個激酶在肝癌組織中表達量下調。這些激酶在人類激酶組的9類中均有分布。對11種差異激酶進行了western blot驗證，結果與質譜定量結果一致，證明了質譜定量的可靠性。通路分析表明，差異激酶涉及多個信號通路，包括MAPK、PI3K/AKT/mTOR、VEGF、Wnt、Hedgehog信號通路、磷脂醯肌醇信號系統及細胞周期。這些通路之間相互作用，形成一個複雜網路，顯示了肝癌發病機制的複雜性。其中VEGFR-2、CDK6和mTOR等24個關鍵激酶參與了這些重要信號通路的調節。生存相關分析表明18種差異激酶與生存密切相關，包括肝癌晚期治療藥物索拉菲尼的重要靶點VEGFR及MAPK通路的重要激酶Erk1。綜上所述，本研究建立了激酶組研究新方法，具有廣泛的套用價值。通過對肝癌激酶組的比較研究，揭示了肝癌發生髮展過程中由激酶介導的信號通路網路的複雜性，為肝癌發病機制及治療研究提供線索。找到了93種差異激酶，它們是肝癌早期診斷標誌物的候選靶標和新藥研究的候選靶點，具有潛在的臨床套用價值和較高的學術價值。
