《基因敲除/敲入小鼠模型的建立和標準化》是依託北京大學，由尹玉新擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：基因敲除/敲入小鼠模型的建立和標準化
- 項目負責人：尹玉新
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
動物模型是現代醫學科學研究的重要實驗方法和手段，能更有效地認識疾病的發生、發展規律並研究防治措施。經典基因敲除、條件性敲除以及敲入小鼠模型是最常用的小鼠模型。PAC1是p53介導凋亡的靶標；PTEN的C末端在許多腫瘤中都發生突變。項目申請人具有豐富的構建抑癌基因小鼠模型經驗，已成功建立了經典的PAC1敲除小鼠模型和PTEN的C末端基因敲入小鼠模型（PTEN R189X），並對其開展了功能研究，對這兩個基因在腫瘤發生中的作用有了更深的了解。運用同樣或相似的技術，本項目擬建立一系列條件性敲除或基因敲入小鼠模型, 包括PP2A條件性敲除小鼠模型和PTEN K144I基因敲入小鼠模型等，以便開展後續功能研究。同時，本項目期望能夠解決小鼠模型建立過程中的技術性難題，並將模型建立標準化，構建一個組織特異性表達的CreERT2的工具鼠庫，為條件性敲除小鼠的研究提供幫助。
結題摘要
動物模型是現代醫學科學研究的重要實驗方法和手段，能更有效地認識疾病的發生、發展規律並研究防治措施。小鼠模型是最廣泛套用的動物模型之一，其中經典基因敲除、條件性敲除以及敲入小鼠模型是最常用的小鼠模型。在本項目的支持下，本課題組成功構建了多個小鼠模型，且套用到了腫瘤相關的研究中，為揭示腫瘤發生、發展的分子機制，獲得新的藥物靶點的研究提供了幫助。同時，還完善各個步驟的操作程式，制定相關條例和統一規範，確立標準流程，使模型建立標準化。基於本項目所構建小鼠模型的科學研究，已發表於本領域高水平雜誌。全身敲除Rpa1的雜合小鼠為世界上首例Rpa1雜合小鼠，對其在體誘導結直腸癌模型的實驗結果表明，缺失了Rpa1的雜合小鼠相較野生型更易誘發腫瘤，證明RPA1對於抑制結直腸癌十分重要，RPA1是PTEN抑制腫瘤形成與發展機制中重要的一個分支。另一個小鼠模型Ptenα基因敲除小鼠模型是世界上首例Ptenα敲除的小鼠模型，通過基於該小鼠模型的研究揭示了PTENα在神經系統中的重要作用，鑑定了一個新的分子調控通路PTENα-CaMKII-NR2B，並證實了該信號通路在調控海馬長時程增強（LTP）和恐懼記憶及空間學習能力的重要性。該模型可以幫助研究者更好地了解PTEN家族的複雜性及其在神經生理和病理調控過程中的重要作用。這些研究發現對於將來的神經疾病的分子診斷及治療有重要的指向作用。構建符合研究者需要的小鼠疾病模型至關重要，不僅可以提供探索科學問題的有力工具，而且可以用於藥物篩選與臨床前期評估。
