《四逆湯抗心力衰竭的作用及其ghrelin機制探討》是依託中山大學，由吳偉康擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：四逆湯抗心力衰竭的作用及其ghrelin機制探討
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：吳偉康
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們早期的工作已經顯示：四逆湯可通過擴張血管、改善心肌能量代謝、抗氧化應激以及抑制細胞凋亡等多個環節保護心肌細胞，改善心臟功能，從而起到防治心力衰竭的作用。我們上一個國家自然科學基金課題的工作觀察到新型腦腸肽－ghrelin對心力衰竭有良好的防治作用。Ghrelin在四逆湯抗心衰效應中是否是一個中介物質尚不清楚，這是一個值得探討的課題。 雖然ghrelin抗心衰的作用顯著，但其價格極其昂貴（每毫克ghrelin，約人民幣1.2萬），不具備臨床實用性。因此，在我們已有工作的基礎上，深入觀察四逆湯抗心衰的作用及其ghrelin機制，不但在四逆湯抗心衰研究方面可獲得前沿性的理論信息， 為中藥抗心衰的獨特的整體調節作用找到新的實驗依據，並為四逆湯用於心衰的臨床防治提供新的線索和更深入全面的理論依據。
結題摘要
背景 本研究的目的在於探討聯用去甲烏藥鹼和[6]-姜酚對阿黴素性心肌損傷的保護作用及其可能的機制。方法 培養原代心肌細胞和H9c2心肌細胞。使用阿黴素處理心肌細胞12小時，建立心肌細胞損傷的實驗模型。套用MTT法檢測細胞存活率;雙氯螢光素（DCFHDA）染色 螢光顯微鏡拍照檢測細胞內活性氧（ROS）的水平，丙酮酸比色法、TBA比色法和DTNB(雙硫代對硝基苯甲酸)法測定乳酸脫氫酶（LDH）、脂質過氧化產物(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。JC-1染色雷射共聚焦顯微鏡拍照檢測線粒體膜電位(MMP)。DAPI染色螢光顯微鏡拍照及Annexin V染色流式細胞儀檢測細胞凋亡率；Western Blot法檢測Cleaved Caspase-3、pro-Caspase-3、P-Akt、Akt,細胞色素C及Bax和Bcl-2的表達；螢光定量PCR法檢測Bax、Bcl-2 mRNA的表達。結果 與對照組相比，阿黴素組細胞活力和MMP明顯下降，LDH水平、MDA含量、p-Akt和Cleaved Caspase-3的表達水平及凋亡率明顯增加，Bax/Bcl-2的比值在蛋白和mRNA水平均增高；與阿黴素組相比，去甲烏藥鹼和[6]-姜酚處理組細胞活力上升，與目前臨床上認可的唯一用於預防阿黴素心臟毒性的藥物右雷佐生作用相當，此外，去甲烏藥鹼和[6]-姜酚處理組還可以升高MMP、SOD水平及p-Akt的表達水平，降低LDH水平、MDA含量、Cleaved Caspase-3的表達水平、凋亡率及Bax/Bcl-2的比值。加入PI3K抑制劑後，藥物的保護作用消失。結論 聯用去甲烏藥鹼和[6]-姜酚可以減輕阿黴素性心肌損傷的程度，其保護效應產生機制可能與去甲烏藥鹼和[6]-姜酚的抗氧化應激效應及激活P13K/AKT信號轉導通路有關。
