《嗜鹼丙氨酸消旋酶催化機制的研究》是依託河北師範大學,由鞠建松擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名:嗜鹼丙氨酸消旋酶催化機制的研究
- 項目類別:面上項目
- 項目負責人:鞠建松
- 依託單位:河北師範大學
- 負責人職稱:教授
- 批准號:30970628
- 研究期限:2010-01-01 至 2010-12-31
- 申請代碼:C0505
- 支持經費:8(萬元)
項目摘要
自然界中存在游離的L-丙氨酸,而不存在D-丙氨酸,細菌細胞壁肽聚糖層的合成需要D-丙氨酸。丙氨酸消旋酶(alanine racemase, EC 5.1.1.1) 具有催化L-丙氨酸和D-丙氨酸相互之間的轉化作用,為細胞壁肽聚糖層的合成提供必要的D-丙氨酸。本研究從嗜鹼芽胞桿菌中克隆獲得了一個丙氨酸消旋酶基因,該基因長1110bp,編碼370個胺基酸,與基因庫中胺基酸序列最高同源性為48%,其最適反應pH值為10.5,對底物的催化能力為Vmax-L,10500 units/mg,Vmax-D,3708 units/mg,是目前所發現的同類酶中最高的,蛋白晶體結構解析結果發現該蛋白結構與中性和弱嗜鹼丙氨酸消旋酶存在差異,實驗擬運用定點突變、飽和突變等分子生物學手段,結合蛋白結構信息,尋找出該蛋白嗜鹼的關鍵胺基酸或胺基酸區域,以充分了解其催化反應機制,為探索嗜鹼酶蛋白的嗜鹼機理提供理論依據。