嗜酸乳桿菌LuxS/AI-2在種間密度感應調節中的作用研究

《嗜酸乳桿菌LuxS/AI-2在種間密度感應調節中的作用研究》是依託鄭州大學，由周琳擔任項目負責人的聯合基金項目。

基本介紹

• 中文名：嗜酸乳桿菌LuxS/AI-2在種間密度感應調節中的作用研究
• 項目類別：聯合基金項目
• 項目負責人：周琳
• 依託單位：鄭州大學

項目摘要

牙菌斑生物膜是多細菌相互作用的小生境。在這小生境中細菌之間通過密度感應機制發生信號交流及生物調節，其中，種間密度感應調節更是主導著齲病的發生髮展。變異鏈球菌、嗜酸乳桿菌是這一過程中的關鍵致齲菌，相互之間有著彼此消長的特徵。兩菌均有種屬間信號網路LuxS/AI-2介導的密度感應系統，但嗜酸乳桿菌密度感應機制是否在與變異鏈球菌共存時發揮競爭抑制作用尚不清楚。本研究通過構建兩菌螢光報告株及嗜酸乳桿菌LuxS基因失活株等手段，在微流體系統下進行兩菌共培養，分析在不同條件下，嗜酸乳桿菌在產酸耐酸、生物膜形成、細菌素產生及胞外基質的不同變化，探索嗜酸乳桿菌Lux及相關基因在牙菌斑生物膜中與變異鏈球菌相互作用的特徵，研究嗜酸乳桿菌LuxS/AI-2信號網路在種間密度感應系統中的調控方式和特點，揭示兩菌之間的相互作用對齲病發生髮展的意義，探索齲病發展的細菌學信號調控機制，為進一步開展防齲機制研究創造條件。

結題摘要

種間密度感應調節主導著齲病的發生髮展，變形鏈球菌和嗜酸乳桿菌是這一過程中的重要致齲菌，嗜酸乳桿菌與變形鏈球菌共存時的競爭抑制作用對於齲病的研究具有重要作用。本研究構建了嗜酸乳桿菌和變形鏈球菌的螢光報告菌株，並將兩菌進行共培養，通過生長曲線的測定和生物膜測定，證明了兩菌在共培養時存在的競爭抑制關係，且嗜酸乳桿菌與變形鏈球菌競爭在生物膜中的定植粘附有一定優勢。在嗜酸乳桿菌LuxS突變株構建過程中，在查得其基因位點後，經酶切將LBA1801基因成功合成並構建到pUC57載體上，但將目的基因LBA1801亞克隆到目的載體pORI28中難度很大，使用酶切酶連方案和同源重組方案嘗試多次均不能連線成功。經過分析，目的基因沒有難度，主要難度在於目的載體pORI28很難插入序列。可能還有其他的特殊條件。目前正在嘗試高活性的感受態細胞或載體及其他可能的方式和條件。由於嗜酸乳桿菌LuxS突變株暫時未能構建成功，導致後續突變後細菌的相應生物學性能無法檢測，希望能給與時間和機會準予繼續完成研究。