《單胺類神經遞質分離分析新方法研究》是依託湖南師範大學，由馬銘擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：單胺類神經遞質分離分析新方法研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：馬銘
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
將化學科學中分離提取、材料科學中新材料合成及生命科學中藥物干預等領域進行交叉融合，依據單胺類神經遞質的結構特點，合成高選擇性的液相微萃取載體、磁性納米粒子和微填充吸附柱吸附劑，採用載體輔助分散液相微萃取、磁性納米粒子及微填充吸附柱等技術分離富集單胺類神經遞質，通過對電極表面進行選擇性修飾，建立高選擇性和高靈敏度的單胺類神經遞質去甲腎上腺素、腎上腺素、多巴胺和5-羥色胺的分離分析新方法。考察單胺類神經遞質的分離提取和分析檢測機制，採用有明確抗抑鬱活性的生物鹼干預，通過微透析取樣-微填充吸附柱富集-高效液相色譜-電化學檢測器聯用（MD-APMC-HPLC-ECD）動態監測單胺類神經遞質的表達，探究藥物的作用機理，為中藥抗抑鬱活性成分的篩選提供有意義的參考。主要研究以下內容（1）單胺類神經遞質分離富集新方法研究；（2）單胺類神經遞質HPLC-ECD分析新方法研究；（3）生物鹼抗抑鬱作用機理研究。
結題摘要
單胺類神經遞質包括兒茶酚胺類的去甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(E)和多巴胺(DA)及吲哚胺類的5-羥色胺(5-HT)，在中樞神經系統中具有重要功能，準確檢測其在腦組織和體液中的含量具有重要意義。據此，我們開展了如下研究工作：（1）針對單胺類神經遞質具有強親水性、提取困難和微升級接受相收集困難的特點，我們提出了基於載體輔助和接受相固化的分散液相微萃取分離富集新方法，藉助載體的選擇性、分散液相微萃取高的兩相接觸面積以及固化接受相便捷收集等操作，實現了對親水性目標物的高效提取。結合高效液相色譜（HPLC）-電化學檢測（ECD）或二極體陣列檢測（DAD），建立了尿樣中單胺類神經遞質及代謝物的高靈敏分析方法，NE、E、DA、5-HT、代謝物5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）、高香草酸（HVA）和香草扁桃酸（VMA）的檢出限(S/N=3)分別達到了5.7、5.5、6.1、10.8、2、2和1 ng/mL，加標回收率大於84%；設計合成了幾種表面具有特殊官能團、高選擇性的磁性粒子，對目標分析物展示了高的選擇性和結合性，結合HPLC-ECD或敞開式質譜分析，建立了幾種尿樣中單胺類神經遞質及代謝物的高靈敏分析方法，檢出限可低至11.8（NE）、7.5（E）和9.6 ng/mL（DA）；（2）將與HPLC聯用的安培檢測器噴壁式與薄層式相結合，設計出了噴壁/薄層式安培電化學檢測器，不僅增加了工作電極表面對電活性待測物的捕獲，提高了靈敏度，且易於電極表面的清洗和更新，建立了兩種單胺類神經遞質及代謝產物的分析方法，方法的檢出限分別為1.1 nmol/L（DA）和0.7 nmol/L（HAV），低於紫外檢測器和商用ECD檢測結果；（3）初步探討了生物鹼對單胺類神經遞質的干預作用；（4）探索了分離分析新技術、新材料在有機物、重金屬離子分離分析及生物感測和生物燃料電池中的套用研究。項目研究為廣泛探索高選擇性的分離富集新技術和新材料提供了有意義的指導。基金資助的研究成果已發表論文12篇，申請國家發明專利2項（1項獲授權）。
