《同種異型DC刺激CD4+T細胞高效產生Foxp3+Treg的分子機制》是依託山東大學，由張利寧擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：同種異型DC刺激CD4+T細胞高效產生Foxp3+Treg的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張利寧
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
Foxp3是調節性T細胞（Treg）發育、分化和發揮免疫抑制效應的重要轉錄因子。前期研究中我們發現小鼠同種異型DC可刺激CD4+T細胞高效產生Foxp3+Treg；而自身DC無此作用，並在人Treg的產生中也得到類似結果。這為獲得足夠數量Treg防治疾病提供了一種簡便方法，但其機制尚不清楚。為了探討其分子機制和信號通路，本課題擬利用前期建立的研究體系，從Foxp3表達調控的最新模式-Foxp3特異性增強子複合體入手，採用染色質免疫沉澱法等技術比較同種異型DC和自身DC刺激CD4+T細胞過程中調控Foxp3表達的相關轉錄因子，分析Foxp3特異性增強子複合體的組成或形成能力；並通過基因敲除或阻斷實驗確定同種異型DC上調Foxp3表達的主要信號通路和關鍵轉錄因子, 研究結果對揭示Foxp3的表達調控模式、制定調控Foxp3+Treg數量的策略、防治疾病具有重要的理論價值和潛在的套用價值。
結題摘要
研究背景：調節性T細胞（Treg）在維持免疫耐受、控制自身免疫性疾病、抑制移植排斥反應中發揮著重要作用。Foxp3是Treg發育、分化和發揮免疫抑制效應的重要轉錄因子。本研究的目的是探索調控Foxp3表達的模式，為調控Foxp3+Treg的數量、防治疾病奠定基礎。 主要研究內容和完成情況：原計畫主要包括兩部分內容：一是 研究自身DC和同種異型DC刺激CD4+T細胞增殖體系對CD4+T細胞中Foxp3表達的不同影響；二是比較自身DC和同種異型DC刺激體系中調控Foxp3表達的轉錄因子和Foxp3特異性增強子複合體的差異，探索其調控機制。 第一部分內容已按計畫完成，第二部分工作在試驗中遇到了難以克服的困難,經過反覆嘗試很難達到預期結果，故對研究計畫進行了調整，從尋找調控Foxp3的轉錄因子和特異性增強子複合體轉向尋找調控Foxp3表達和Foxp+Treg的新基因或新策略。 主要研究結果：①發現在無外源性細胞因子的存在下，同種異型（DC）可有效刺激CD4+T細胞中Foxp3+Treg的產生，其活化的CD4+CD25+T細胞中80%以上表達Foxp3, 而自身（或同基因型）DC的作用很弱，其活化的CD4+ CD25+T細胞中Foxp3的表達不足10%；②發現新的抑癌基因PDCD4具有調控Foxp3+ CD4+Treg的作用，在高血脂環境下，PDCD4基因敲除小鼠脾臟Foxp3+CD4+ Treg細胞數量升高、動脈粥樣硬化斑塊局部Foxp3的轉錄水平也明顯升高，且Foxp3的表達水平與動脈粥樣硬化斑塊的大小呈負相關關係；③發現PI3K抑制劑3-MA體內套用上調Foxp3及Fox3+Treg 相關細胞因子（IL-10、IL-35、TFG-beta）表達並抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成和斑塊的不穩定性；④發現用內質網化學伴侶分子PBA阻斷內質網應激，可以上調小鼠體內Foxp3和Foxp3+Treg的水平及抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成和斑塊的不穩定性。 研究的意義：發現同種異型DC、PI3K抑制劑3-MA、內質網伴侶分子PBA和PDCD4可調控Foxp3表達和FoxP3+Treg的數量並在小鼠高脂誘導的動脈粥樣硬化化模型中證明3-MA、PBA和敲除PDCD4可明顯降低動脈粥樣硬化斑塊的形成和斑塊的不穩定性，為用3-MA、PBA和以PDCD4為靶點治療動脈粥樣硬化提供了實驗數據。
