《口腔鱗癌VEGF誘導DC向內皮細胞轉分化及其機制研究》是依託南京大學，由胡勤剛擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：口腔鱗癌VEGF誘導DC向內皮細胞轉分化及其機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡勤剛
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
口腔鱗癌生物治療效果並不理想，腫瘤的免疫逃逸機制在其中發揮了重要作用。而腫瘤分泌的VEGF抑制了DC激活T淋巴細胞的抗瘤效應是其重要原因之一。文獻報導，參與機體新生血管形成的EC與DC具有共同的前體細胞。本課題組將體外誘導的DC與高表達VEGF的舌鱗癌細胞株共培養，發現DC可逆向表達分化分子表型，提示DC在VEGF作用下可能向內皮細胞轉分化。本研究擬以舌鱗癌細胞系與DC體外共培養，觀察腫瘤VEGF誘導DC向EC轉分化並參與腫瘤血管形成的作用；利用基因晶片技術檢測該轉分化的基因表達的變化，分析其差異表達基因，構建相關信號傳導途徑；篩選信號傳導關鍵分子，並以相應阻斷劑或RNAi技術，檢驗該關鍵分子在VEGF誘導DC向內皮細胞轉分化及其在腫瘤血管形成過程中的作用，以期闡明DC向內皮細胞轉分化的分子機制。本研究將為腫瘤的免疫逃逸機制提出新的理論和認識，有助於發展口腔鱗癌生物治療的新手段和新方法。
結題摘要
本研究利用流式細胞術對發現OSCC患者外周血中髓樣DC（mDC）比例顯著降低(P＜0.0001)，具有成血管功能的CD14+Tie2+細胞及髓樣起源抑制細胞MDSC、抑制性T細胞（Ts）、調節性T細胞（Treg）細胞比例顯著升高(P＜0.0001)；而輔助性T細胞（Th）比例降低 (P＜0.005)。體外實驗明確OSCC內VEGF參與了DC的異常分化為具有內皮樣細胞特徵的細胞群及MDSC細胞群。其次，在 OSCC腫瘤組織局部探討了VEGF表達及CD14+前體DC的浸潤，發現OSCC內VEGF高表達，CD14+前體DC的浸潤程度高；VEGF的表達與MCP的表達呈正相關（P=0.00005）； OSCC癌灶組織癌巢內VEGF表達與腫瘤的TNM分期呈正相關(P=0.017)；間質內而非癌灶內CD14+ 前體DC浸潤與腫瘤分化呈正相關(P=0.0478)。提示口腔鱗癌中VEGF能夠趨化前體DC至腫瘤區，並參與了腫瘤進程。進一步，為了探明癌灶組織內高濃度的VEGF是否趨化外周血內前體DC至腫瘤區，我們進行Transwell實驗，發現OSCC微環境內高濃度的VEGF可趨化前體DC至腫瘤微環境內；添加VEGF後DC表面的標記顯著性降低。此部分證實：VEGF促進了前體DC遷移至口腔鱗癌微環境內。並對進行了活體成像進行了研究。最後，探明OSCC內VEGF通過JAK/STAT3通路改變了DC的正常分化途徑。首次發現OSCC癌巢組織內p-STAT3表達與腫瘤分化相關(P=0.05)；間質內p-STAT3表達與炎性免疫細胞浸潤相關(P=0.025)；體外實驗發現高濃度OSCC培養體系中p-STAT3表達較對照組顯著升高，而在拮抗VEGF表達後p-STAT3表達低。 綜上所述，本研究 ①發現高表達VEGF的OSCC腫瘤中前體DC異常分化； ②首次發現癌灶中VEGF、CD14及p-STAT3表達與腫瘤進程有關且STAT3活化與腫瘤浸潤的免疫細胞的關係；③在口腔鱗癌中發現OSCC腫瘤細胞分泌的VEGF也可趨化前體DC至癌灶並確認可通過JAK/STAT3通路異常活化調控DC異常分化。
