卵巢癌早期免疫診斷標誌物的鑑定、篩選和評價

《卵巢癌早期免疫診斷標誌物的鑑定、篩選和評價》是依託鄭州大學，由張建營擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：卵巢癌早期免疫診斷標誌物的鑑定、篩選和評價
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張建營
• 依託單位：鄭州大學

項目摘要

卵巢癌是女性常見的惡性腫瘤之一，早期症狀體徵不明顯，又缺乏早期診斷方法，致使70%左右的患者初診時已屬晚期，失去徹底治療的機會。儘管有一些腫瘤標誌物如CA125等可用於卵巢癌的診斷，但敏感性和特異性均不高，尤其是對卵巢癌早期診斷價值不大。鑒於此，探索和發現敏感和特異的卵巢癌早期診斷標誌物具有重要的臨床價值和意義。以往研究表明腫瘤病人血清中存在有各種類型的抗細胞自身抗原的抗體，這些與腫瘤發生有關的抗原被稱為腫瘤相關抗原(TAA)。可以假設出現在卵巢癌病人血清中的自身抗體反應是機體針對參與卵巢上皮細胞癌變過程中的一些細胞內抗原的免疫反應。本課題在以前研究工作的基礎上，採用cDNA文庫篩選和蛋白質組學技術鑑定卵巢癌相關腫瘤抗原，設計針對卵巢癌特異的腫瘤相關抗原組合，並對其作為卵巢癌早期免疫診斷標誌的可行性進行評價，從而為建立一種新的卵巢癌早期體外非侵入性免疫診斷技術提供理論依據。

結題摘要

卵巢癌是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，缺乏有效的早診方法，探索發現敏感特異的卵巢癌早診標誌物具有重要的臨床價值和意義。腫瘤病人血清中存在有各種類型的抗細胞自身抗原的抗體，這些與腫瘤發生有關的抗原被稱為腫瘤相關抗原(TAA)。可以假設出現在卵巢癌病人血清中的自身抗體反應是機體針對參與卵巢上皮細胞癌變過程中的一些細胞內抗原的免疫反應，因此對血清中存在的抗-TAA抗體的檢測可以用於腫瘤的早期診斷和預後評價。在前工作基礎上，採用蛋白質組學技術鑑定卵巢癌相關腫瘤抗原，從編碼這些抗原的基因水平和蛋白水平進行了相關研究，進一步運用系統綜述和薈萃分析的方法，設計針對卵巢癌特異的TAA組合，對其作為卵巢癌早期免疫診斷標誌的可行性進行全面評價。 卵巢癌早期免疫診斷標誌物（TAA）的篩選和鑑定：western blot、雙向凝膠電泳分離卵巢癌和正常人血清中表達的蛋白，在卵巢癌血清中，分子大小在37KDa-50KDa之間的條帶比例較高；質譜分析明確了2個差異表達蛋白。 TAA IMP1 和p62/IMP2在卵巢癌中的免疫診斷及在肝癌細胞系中的定位：ELISA技術檢測IMP1 和p62/IMP2自身抗體在卵巢癌患者和正常人血清中的表達，患者中抗體陽性率明顯高於正常人；免疫螢光實驗檢測二者在 HEp-2細胞中的定位，均為胞漿陽性。 卵巢癌TAA的表達和蛋白純化：利用原核表達技術和相關蛋白表達純化技術，構建三種蛋白的表達質粒，進行後續的蛋白表達和純化，成功獲得Koc、C-myc、HCC1 三種純化蛋白。 卵巢癌TAA的系統篩選及在卵巢癌中的診斷價值：利用系統綜述方法，對卵巢癌相關抗原研究匯總，有60篇公開發表論文、113個TAA及自身抗體納入分析中，進行最佳化組合，分別利用6種和12種TAA聯合對卵巢癌的診斷價值進行評價，驗證了抗TAA自身抗體聯合檢測確實能夠提高卵巢癌的診斷價值，對卵巢癌術後病情監測和預後評價也有一定參考價值。 到目前為止還沒有一種藥物能夠從根本上徹底治癒腫瘤，要達到臨床基本治癒癌症或者延長病人的生命，唯一的辦法就是早發現、早診斷和早治療，即“三早措施”。因此如何能夠對包括卵巢癌在內的所有癌症病人進行早期診斷已成為各國腫瘤學研究者重點探索和研究的課題。本研究的實施，為建立一種新的卵巢癌早期體外非侵入性免疫診斷技術和手段提供了科學依據和資料。