《功能性毛細胞原位再生的相關性研究》是依託復旦大學，由韓朝擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：功能性毛細胞原位再生的相關性研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：韓朝
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
哺乳動物耳蝸毛細胞損害後不能自發再生，目前實現了異位毛細胞再生和神經纖維向其趨化生長，但是最可能實現聽覺恢復的原位毛細胞再生尚未實現。本課題組的前期工作在在體/離體實現了毛細胞異位再生並發現原位毛細胞再生現象。本研究重點解決毛細胞原位再生的相關問題：1.誘導聽感覺上皮區產生原位毛細胞：通過基因調控增加原位支持細胞數量並向毛細胞轉分化；促使外源性幹細胞在Deiters細胞區著床並向毛細胞轉化。2.促使原位再生毛細胞與支持細胞建立結構聯繫：激活Notch信號通路，促使支持細胞包繞新生毛細胞；松解細胞間連線，促使支持細胞-毛細胞馬賽克鑲嵌結構形成。3.促使原位再生毛細胞與殘存螺旋神經元形成功能性突觸聯繫：利用神經營養因子對螺旋神經元向毛細胞發出纖維並形成突觸連線起關鍵作用的特性誘導新突觸形成；使用電生理等技術驗證新形成的突觸聯繫信號傳遞功能。上述問題的解決將為最終利用毛細胞再生治療耳聾奠定基礎。
結題摘要
哺乳動物耳蝸毛細胞損害後不能自發再生,目前實現了異位毛細胞再生和神經纖維向其趨化生長,但是最可能實現聽覺恢復的原位毛細胞再生尚未實現。本研究重點解決了毛細胞原位再生及損傷的相關問題:1.誘導聽感覺上皮區產生原位毛細胞:通過胰酶消化新黴素損傷原位毛細胞的基底膜感覺上皮，增加原位支持細胞的細胞間隙可提高原位轉染效率；基底膜機械性物理損傷同樣可提高病毒原位轉染效率；通過cyclin D1基因調控促進支持細胞分裂增殖，增加原位支持細胞數量；通過Math1基因調控促進支持細胞向毛細胞轉分化，但cyclin D1誘導增殖的支持細胞不能回響Math1的調控轉分化為毛細胞；通過使用DAPT抑制Notch信號通路可以促使原位毛細胞再生，且影響原位及再生毛細胞的極性。而DAPT和Math1的聯合套用可增加Math1的表達水平，降低hes1和hes5的表達水平，進一步促進了毛細胞的再生。2.誘導耳蝸神經幹細胞分化為耳蝸神經元：通過利用銀杏葉提取物（GBE）、神經生長因子（NGF）、雷公藤紅素誘導培養耳蝸神經幹細胞，增加了耳蝸幹細胞的活性和增殖，以及神經幹細胞的成球和分化為神經元的能力，分化的神經元具有神經興奮性；其中，GBE和NGF可促進分化神經元的神經纖維生長。3.毛細胞帶狀突觸的損傷：通過CoCl2誘導缺氧環境損傷耳蝸基底膜，帶狀突觸在缺氧早期首先受到影響，表現為數量增加，同時，神經營養因子BDNF的表達水平增高；通過外源性使用BDNF，帶狀突觸也表現為數量增加。總之，研究加深了對毛細胞原位再生及耳蝸神經元再生的性質的了解，為研究外源性營養因子對耳蝸神經元連線的影響及功能性的毛細胞原位再生打下了基礎；研究提示帶狀突觸是缺氧誘導損傷毛細胞之前的靶點，為後續對耳鳴的研究提供了基礎。
