利用蛋白質組學方法研究油菜素內酯信號轉導的新成員

《利用蛋白質組學方法研究油菜素內酯信號轉導的新成員》是依託河北師範大學，由湯文強擔任項目負責人的重大研究計畫。

基本介紹

• 中文名：利用蛋白質組學方法研究油菜素內酯信號轉導的新成員
• 項目類別：重大研究計畫
• 項目負責人：湯文強
• 依託單位：河北師範大學

項目摘要

基因冗餘現象令利用突變體篩選研究植物信號轉導變得越來越困難。蛋白質是細胞功能的最終執行者，且信號轉導過程往往與蛋白質的翻譯後修飾相關，因此利用蛋白質組學方法來尋找這些在信號轉導中被修飾的蛋白，近年來已成為研究信號轉導途徑的一種新手段。利用蛋白質組學方法，我們發現了一個參與BR信號轉導的新成員BRP.本項目將利用酵母雙雜交，免疫共沉澱等方法來尋找能和BRP相互作用的蛋白；並通過蛋白質組學，分子生物學，遺傳學和生物化學等研究手段對BRP在BR信號轉導過程中的作用機理進行深入的研究。同時我們將繼續利用蛋白質組學方法來尋找其它的質膜上受BR調節的蛋白。通過對這些質膜上的BR調節蛋白的研究，我們將對BR調節細胞生長的分子機理有更深入的理解。

結題摘要

BR信號傳導主要由一系列蛋白磷酸化和去磷酸化事件來介導，但是此前的BR信號傳導的研究主要側重於蛋白級聯磷酸化的研究，對於磷酸化的BR信號組分如何去磷酸化的研究卻不是非常的清楚。通過本項目的研究，申請人發現蛋白磷酸酶PP2A在BR信號傳導中起雙而向調節作用。一方面PP2A B’α和B’β能通過將BZR1去磷酸化，啟動下游BR調節的基因表達來正向調節BR信號傳導途徑。另一方面，PP2A B’亞基家族其他成員如B’η還能與BR受體BRI1結合，並通過將BRI1去磷酸化來反向調節BR信號傳導途徑。進一步的研究發現不同PP2A B’亞基的這種功能的區別主要是由於他們在細胞核中定位與否決定的。我們的研究表明正向調節因子PP2A B’α和B’β定位在胞質和細胞核中，而其他起反向調節作用的PP2A B’家族成員則只定位在細胞質中。如果將BR正向調節蛋白B’β人為地加上出核序列使其定位在胞質中，B’β則抑制BR信號傳遞。反之，如果將B’η人為加上一段核定位序列使其定位在細胞核中，B’η則能正向調節BR信號傳遞。這些結果為研究BR信號傳導途徑中蛋白去磷酸化調節機制提供了重要的線索。