《內質網應激激活PI3K通路誘導肝癌細胞耐藥的分子機制》是依託鄭州大學，由翟文龍擔任項目負責人的聯合基金項目。
基本介紹
- 中文名：內質網應激激活PI3K通路誘導肝癌細胞耐藥的分子機制
- 項目類別：聯合基金項目
- 項目負責人：翟文龍
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
內質網應激反應是細胞逃避損傷的一種自我保護反應，可誘導腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥。鈣網蛋白屬於分子伴侶，可參與內質網應激反應，並可發生膜轉位，膜轉位後的鈣網蛋白與PI3K通路的激活有關。我們前期研究結果顯示內質網應激可通過激活PI3K/Akt通路誘導肝癌細胞對阿黴素產生耐藥。但內質網應激激活PI3K的分子機制尚不清楚。本研究擬從以下幾方面探討內質網應激是否通過誘導鈣網蛋白膜轉位來激活PI3K通路，進而引發肝癌細胞對阿黴素耐藥：1.檢測內質網應激可否誘導肝癌細胞內鈣網蛋白發生膜轉位及其轉位後是否與PI3K發生免疫共沉澱。2.干擾肝癌細胞內鈣網蛋白的膜轉位，觀察它對PI3K通路活化狀態的影響。3.檢測鈣網蛋白膜轉位受阻能否逆轉內質網應激誘導的肝癌細胞對阿黴素的耐藥現象，揭示內質網應激通過誘導鈣網蛋白膜轉位來激活PI3K通路，引發肝癌細胞對阿黴素產生耐藥的機制。
結題摘要
肝癌是全球範圍內第五大常見惡性腫瘤，患者就診時已屬於中晚期，失去手術根治的機會，化療藥物治療在治療中晚期肝癌扮演重要角色，然而，肝細胞癌對化療藥物敏感性下降是導致肝癌治療效果不佳的重要原因之一。內質網（Endoplasmic reticulum）在一些理化因素如缺血，缺氧，營養缺乏，酸中毒刺激下，導致未摺疊蛋白在內質網堆積，引發細胞一系列適應性反應，稱為內質網應激(Endoplasmic reticulum stress ERs)，當未摺疊蛋白的堆積超過內質網的承受能力時，內質網通過激活其下游分子ATF（activating transcription factor 6）、RNA-dependent protein kinase(PKR)- likeendoplasmic reticulum kinase（PERK）、IRE1（inositol-requiring enzyme 1）與免疫球蛋白重鏈結合蛋白（immunoglobulin heavy chain bingding protein Bip）誘發細胞產生耐藥、增殖、轉移等自我保護。本研究的主要內容分為三個部分：（1）：觀察內質網應激可否引起內質網分子伴侶鈣網蛋白（calreticulin CRT）發生膜轉位並引起肝癌細胞耐藥的發生；（2）：CRT膜轉位後與PI3K作用機制；（3）:CRT/PI3K/Akt通路在肝癌細胞耐藥的作用及分子機制。本研究發現內質網應激可激活PI3K/Akt信號通路並誘導肝癌細胞SMMC-7721、HepG2對阿黴素產生耐藥，利用PI3K特異性阻斷劑後可抑制內質網應激介導的耐藥，提示PI3K/Akt通路參與了內質網應激介導的肝癌細胞對阿黴素的耐藥。內質網應激後促進CRT發生膜轉位，同時利用免疫共沉澱技術發現CRT通過與PI3K相互結合的機制參與了內質網應激介導的肝癌細胞的耐藥，利用小干擾RNA技術沉默CRT在肝癌細胞的表達後證實了CRT在肝癌細胞增殖、凋亡、轉移中的的作用，闡述了CRT/PI3K/Akt信號通路參與肝癌細胞耐藥的機制，為肝癌細胞耐藥的現象奠定了機制基礎，為中晚期肝癌患者的治療提供新的治療思路。
