《內皮酯酶在動脈粥樣硬化發生和發展中作用研究》是依託西安交通大學，由劉恩岐擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：內皮酯酶在動脈粥樣硬化發生和發展中作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉恩岐
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
內皮酯酶(EL)是內皮細胞等分泌的脂肪酶，與高密度脂蛋白(HDL)代謝密切相關。既往實驗研究和臨床觀察，未能確定EL在動脈粥樣硬化疾病中作用。家兔脂質代謝特徵與人類相似，適合EL研究。本課題擬分別製作肝臟和巨噬細胞特異表達人類EL基因的2個轉基因家兔模型，高膽固醇飼料誘導動脈粥樣硬化，觀察轉基因家兔HDL代謝和動脈粥樣硬化斑塊特徵，研究EL與動脈粥樣硬化疾病的關係；分離培養轉基因家兔肝細胞、巨噬細胞，觀察EL對細胞膜受體ABCA1、SR-B1以及細胞內膽固醇流出率影響；分離培養人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)，利用重組腺病毒感染和iRNA技術，上調或下調HUVECs中EL水平，觀察EL在正常、過表達、低表達情況下對炎症分子、NO信號分子和亞硝基化蛋白水平影響。在分子、細胞以及整體轉基因動物水平上，系統研究EL在動脈粥樣硬化形成和發展中分子病理生理學機制，為人類心血管疾病探索新的治療靶點。
結題摘要
內皮酯酶(endothelia lipase, EL)是內皮細胞等分泌的脂肪酶，與脂代謝有關。既往實驗研究和臨床觀察，未能確定EL在動脈粥樣硬化疾病中作用。家兔脂質代謝特徵與人類相似，適合EL研究。在本研究中我們製作了家兔肝臟特異表達人類EL基因的轉基因(Tg)家兔模型，高膽固醇飼料(HCD)誘導動脈粥樣硬化，觀察EL對脂代謝和動脈粥樣硬化形成影響；分離培養人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)，利用重組腺病毒感染和iRNA技術，上調或下調HUVECs中EL水平，觀察EL在正常、過表達、低表達情況下對炎症分子影響。家兔飼餵HCD後，和對照同窩非轉基因(Non-Tg)相比，Tg家兔血漿總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)水平明顯降低(p<0.05或0.01)；Tg家兔主動脈、主動脈弓、胸主動脈和腹主動脈動脈粥樣硬化板塊損傷面積顯著減少(p＜0.05或0.01)；冠狀動脈粥樣硬化狹窄面積有減少趨勢，但沒有統計差異(p>0.05)。HUVECs過表達EL，RT-PCR檢測了相關炎症因子mRNA水平，發現EL能夠極顯著上調TNF-α、VCAM、ICAM和IL-6等炎症因子表達水平(p＜0.01)。利用構建好的siRNA-EL片段轉染HUVEC細胞，發現下調EL能夠抑制TNF-α、ICAM和IL-6 mRNA表達(p＜0.01)，但不影響VCAM。上調和下調EL對HUVEC細胞培養上清液NO水平無明顯影響。以上研究發現提示家兔肝臟特異性表達人EL後能夠降低動脈粥樣硬化損傷，其機理可能與EL降血脂有關、與抗炎作用關係不大，這為研究EL在人類動脈粥樣硬化形成和發展中分子病理生理學機制、發現相關新的治療靶點提供了重要實驗數據。
