免疫球蛋白樣轉錄物3在心肌肥厚中的作用及機制

《免疫球蛋白樣轉錄物3在心肌肥厚中的作用及機制》是依託武漢大學，由周恆擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：免疫球蛋白樣轉錄物3在心肌肥厚中的作用及機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：周恆
• 依託單位：武漢大學

項目摘要

炎症反應及其相關的細胞信號轉導通路參與了心肌肥厚的發生髮展。免疫球蛋白樣轉錄物3（ILT3）可抑制細胞的信號轉導並減少炎症因子釋放，但其在心肌肥厚中的作用尚未見報導。我們初步的研究結果顯示ILT3與心肌肥厚相關。本項目擬套用ILT3心臟特異性轉基因小鼠與基因敲除小鼠，建立壓力負荷誘導的心肌肥厚模型，從心臟功能、大體觀察、組織病理、分子標誌物表達等多個層面研究ILT3對心肌肥厚與纖維化的影響。進一步探討ILT3對心肌組織炎症反應以及SHP-1、SHP-2、Src、MAPKs、PI3K/Akt、NF-κB等細胞內信號轉導通路的作用，以明確ILT3影響心肌肥厚的機制。體外培養原代大鼠心肌細胞，通過過表達或沉默ILT3，觀察ILT3對血管緊張素II誘導的心肌細胞肥大、炎症反應以及信號轉導通路的影響。以期闡明ILT3在心肌肥厚中的作用與機制，探尋防治心肌肥厚與心力衰竭的新策略。

結題摘要

心肌肥厚是多種心血管疾病向心力衰竭進展的共同病理生理過程，其機制尚未完全闡明，缺少有效的防治措施。炎症反應及其相關的細胞信號轉導通路參與了心肌肥厚的發生髮展。免疫球蛋白樣轉錄物 3（ILT3）可抑制細胞的信號轉導並減少炎症因子釋放，但其在心肌肥厚中的作用尚未見報導。本項目套用 ILT3 心臟特異性轉基因小鼠與基因敲除小鼠，建立壓力負荷誘導的心肌肥厚模型，從心臟功能、大體觀察、組織病理、分子標誌物表達等多個層面研究 ILT3 對心肌肥厚與纖維化的影響，並深入探討了 ILT3 對SHP-2與NF-κB 等細胞內信號轉導通路以及心肌組織炎症因子表達的作用。體外培養原代大鼠心肌細胞，通過過表達或沉默 ILT3，觀察 ILT3 對血管緊張素 II （AngII）誘導的心肌細胞肥大、炎症反應以及信號轉導通路的影響。研究結果顯示，AB術後8W，ILT3轉基因組小鼠與野生型小鼠相比，其死亡率、左室大小、心臟重量明顯減輕，心功能改善；HE與PSR染色顯示其心肌細胞橫截面積與膠原容積分數也明顯降低；RT-PCR表明其心肌肥厚、纖維化、炎症反應標誌物表達水平下調。相反，AB術後2W，ILT3敲除小鼠心室腔大小、心功能受損、心肌肥厚、纖維化與炎症反應程度較野生型小鼠均明顯加重。體外細胞實驗顯示，ITL3也能夠抑制AngII誘導的心肌細胞肥大。Western Blots檢測發現，ITL3過表達抑制了IκB的磷酸化與降解，進而下調NFκB p65的磷酸化；ILT3基因敲除則促進了心肌肥厚過程中NFκB p65的磷酸化激活。免疫共沉澱檢測表明大鼠心肌細胞中可檢測到內源性ILT3與SHP2的結合，而刺激後ITL3與SHP2的結合明顯減少。在心肌細胞中沉默SHP2，會消除ILT3對心肌細胞肥大、NF-κB激活與炎症因子上調的抑制作用。本研究結論認為，ILT3能夠抑制病理性心肌肥厚，其作用是通過調控SHP2依賴的NFκB p65信號通路實現的。本研究闡明了ILT3在心肌肥厚中的作用及作用機制，為探索心肌肥厚的發生髮展機制提供了新線索，為防治心肌肥厚與心力衰竭提供了新的潛在靶點。