《伏隔核miR-29/Dnmt3/Meg3通路參與甲基苯丙胺成癮的機制研究》是依託西安交通大學，由陳騰擔任項目負責人的重點項目。
基本介紹
- 中文名：伏隔核miR-29/Dnmt3/Meg3通路參與甲基苯丙胺成癮的機制研究
- 項目類別：重點項目
- 項目負責人：陳騰
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
伏隔核神經元結構和功能可塑性改變是毒品成癮的重要生物學基礎，但其確切的機制尚不清楚，我們前期的研究結果提示，miR-29/Dnmt3/Meg3通路在此過程中可能參與了重要作用，因此，本研究擬利用慢病毒核團注射技術，建立相關分子過表達及表達抑制的甲基苯丙胺（METH）行為敏化小鼠模型，同時套用METH干預原代中腦神經元，採用RT-PCR、Western blot、重亞硫酸鹽測序等分子生物學研究方法以及透射電鏡、膜片鉗等形態學和電生理研究手段，系統觀察伏隔核以及培養細胞中miR-29、Dnmt3、Meg3的表達和可塑性改變及其對Meg3的靶基因Dlk1的影響，分析miR-29、Dnmt3、Meg3之間的相互作用，進一步探討miR-29/Dnmt3/Meg3通路通過調節Dlk1並作用於Notch信號通路在METH誘導的行為敏化過程中的作用機制，為進一步揭示METH成癮的神經生物學機制奠定基礎。
結題摘要
本項目主要在高通量測序技術獲得的甲基苯丙胺（methamphetamine,METH）成癮小鼠伏隔核（nucleus accumbens,NAc）中microRNA-mRNA表達網路的基礎上，利用腺相關病毒介導過表達或表達抑制載體以及腦立體定位技術，在動物水平上證明了miR-29c、miR-128在NAc中上調/下調能夠顯著增強或抑制METH行為敏化，Notch1在前額葉皮質（prefrontal cortex,PFC）中上調/下調也能夠顯著增強或抑制METH行為敏化。明確了Dnmt3a/b、Meg3參與miR-29c調控METH成癮，而GABAB1受體參與Notch1對METH成癮的調控;利用iTRAQ技術獲得了miR-29c、miR-128調控METH成癮的蛋白表達網路，發現miR-29c、miR-128調控METH成癮的其他神經可塑性信號分子。針對大量microRNA在METH作用下表達下降這一現象，本研究還發現了microRNA生物合成相關蛋白Ago2在NAc神經元中上調/下調能夠顯著抑制或增強METH行為敏化，並發現miR-3068可能是NAc神經元中Ago2依賴microRNA，對METH行為敏化具有調控作用。研究結果為METH成癮機制及防治研究提供了新思路和新靶點。項目原計畫目標全部完成：發表SCI論文16篇，其中具有影響力論文5篇，國核心心期刊論文1篇；為本學科培養青年學術骨幹3名，博士研究生6名，碩士研究生3名；在研期間邀請2名國外本領域的知名專家指導交流，併合作發表SCI論文4篇；選派1名博士研究生前往新加坡國立大學-美國杜克大學醫學院神經科學與行為障礙學系進行為期一年的聯合培養。通過本項目研究工作的實施，課題研究團隊之間的協同促進作用得到明顯加強，研究能力和水平進一步得到提升，為深入研究藥物依賴機制及其防治打下堅實基礎。
