以單分散磁性納米球為雙模板的蛋白質印跡技術

《以單分散磁性納米球為雙模板的蛋白質印跡技術》是依託南開大學,由王荷芳擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:以單分散磁性納米球為雙模板的蛋白質印跡技術
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:王荷芳
  • 依託單位:南開大學
中文摘要,結題摘要,

中文摘要

蛋白質是生命活動的功能執行體,蛋白質組研究已成為21世紀生命科學的焦點之一。在蛋白質組學研究中,蛋白質分子印跡聚合物(MIPs)具有重要的套用價值,而合成蛋白MIPs是一項極具挑戰性的課題。本項目擬以蛋白質抗原決定基功能化的單分散磁性納米球作為雙模板,即既作為蛋白質分子的模板,又作為有序結構光子晶體的模板,發展一種無需標記的蛋白印跡反蛋白石結構光子晶體感測器的製備方法,並把這種方法套用到TGF-beta/Smad信號轉導通路中重要蛋白的無標記感測中。項目的實施可望實現目標蛋白質高選擇性的、高效實用的無標記感測測定;還可以提供一種方便易行的磁力控制組裝製備反蛋白石結構光子晶體的方法,進一步擴大光子晶體的套用範圍。所發展的方法還有望在人類疾病的診治中得到套用。

結題摘要

蛋白質是生命活動的功能執行體,蛋白質的高靈敏區分和檢測一直是生物分析化學的熱點研究領域之一。磁性納米粒子具有獨特的性能,可望在蛋白質區分或檢測中發揮重要作用。本項目的研究工作主要圍繞單分散磁性納米粒子的合成、功能化和套用,以及蛋白質感測測定展開,已發表研究論文10篇(包括5篇Analytical Chemistry,2篇Analyst,1篇Journal of Chromatography A, 1篇Talanta,1篇ChemPlusChem),培養碩士畢業研究生7名。獲授權中國發明專利1項,2013年教育部自然科學一等獎一項。 項目合成了在水中具有良好分散性的聚丙烯酸包覆磁球(PAA-Fe3O4),該磁球在外加磁鐵作用下能組裝出光子晶體結構,其反射光譜波長對海水鹽度有貢獻的常見電解質的總離子強度有高靈敏回響,並且具有快速回響動力學,可望成為新型海水鹽度指示計。所合成的超薄磷酸釔包覆PAA-Fe3O4材料(PAA-Fe3O4@YPO4)具有磁力回響好、移除外磁鐵後易於再分散的特點,因而非常適合於套用於分離富集領域,該複合材料對磷酸化多肽具有吸附脫附快速、非特異性吸附低的優點,因此能高選擇性地捕獲複雜生物樣品如牛奶酶解液和血清樣中的磷酸化肽。項目還提出了磁分離輔助螢光共振能量轉移(MS-FRET)禁阻的新策略高靈敏檢測核仁素蛋白,和不分離的供體和受體的FRET禁阻分析相比,磁分離游離供體的FRET禁阻分析方法的靈敏度提高到25倍,進一步磁分離核仁素誘導而游離的受體的FRET禁阻可進一步把分析靈敏度提高到35倍。項目還提出了雙碎片印跡構建磷光增強探針的新策略和構建了基於單一探針的三維陣列感測區分多種蛋白及糖蛋白。該項目的部分研究成果在推廣功能化磁球的套用和豐富探針構建策略等方面具有重要的意義。

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