《人骨形成蛋白基因在小鼠肌肉組織中的表達研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學,由劉新平擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名:人骨形成蛋白基因在小鼠肌肉組織中的表達研究
- 項目類別:面上項目
- 項目負責人:劉新平
- 依託單位:中國人民解放軍第四軍醫大學
- 批准號:39370679
- 申請代碼:H0605
- 負責人職稱:教授
- 研究期限:1994-01-01 至 1996-12-31
- 支持經費:4(萬元)
中文摘要
1、套用大腸桿菌中表達的人骨形成蛋白的N端片段作為免疫原,免疫紐西蘭白兔,製備了抗人骨形成蛋白抗血清,經免疫轉移電泳證實該抗血清有較好的特異性,ABC免疫組化在正常和惡性腫瘤骨石臘切片上檢測效價為1:100~1:1000。2、將人BMP2A和3C端成熟肽分別克隆入大腸桿菌表達載體,獲得15-20%高表達。表達產物分離純化後埋植小鼠肌肉組織具有很強的誘骨活性,證實了BMP cDNA誘骨活性的最小肽段。3、將人BMP1,2A,3 cDNA有誘骨活性的片段分別克隆入真核表達載體BMG中,構建了重組BMPs,經酶切鑑定為正確的克隆,經氯化銫超速離心得到質量好無RNA污染的重組BMPs。4、將這三種重組人BMPs以不同劑量注射小鼠肌肉組織中,證實了最小誘骨量為60Mg,最早的形態學變化7-10天。